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IGF-ImTOR信号通路调控猪骨骼肌卫星细胞增殖期

生长差异的研究的开题报告

标题：IGF-ImTOR信号通路调控猪骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异

的研究

背景和研究意义：

骨骼肌是猪体内最主要的肌肉组织，其生长发育直接影响肉质品质。

卫星细胞作为肌肉再生和生长的干细胞具有重要的生理作用。IGF-

ImTOR信号通路作为调控细胞生长和代谢的关键通路，已被证明在肌肉

生长和再生过程中发挥着至关重要的作用。然而，现有的研究主要集中

在模式动物上，缺乏在生产性猪种上的验证。因此，本研究的意义在于

深入探究IGF-ImTOR信号通路在猪骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异中的

作用和机制，为猪肉质品质的改良和生产性猪的效益提高提供理论依据

和实践指导。

研究内容和方法：

本研究将从猪骨骼肌卫星细胞分离培养和体内转染两个层面入手，

通过荧光素酶检测法和Westernblot法分析IGF-ImTOR信号通路调控猪

骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异的差异和机制。具体研究内容和方法如

下：

第一部分：猪骨骼肌卫星细胞分离培养

1.1收集4只健康2月龄的皮特兔，分离其大腿肌，截取部位为股骨

外髁及股骨头下的红色骨髓鞘。

1.2对分离得到的骨髓鞘进行胶原酶消化，并经过离心、遍洗、筛选、

培养等步骤，获取纯化且高活性的骨骼肌卫星细胞。

1.3将细胞于含10%胎牛血清（FBS）的DMEM中培养，并进行克

隆分离，筛选出单个克隆的骨骼肌卫星细胞系。

第二部分：IGF-ImTOR信号通路的Westernblot检测及荧光素酶检

测法

2.1将培养好的骨骼肌卫星细胞系分别转染空载体和SiRNA针对

IGF-ImTOR信号通路的基因，收集细胞株。

2.2采用Westernblot法检测各组细胞株的IGF-ImTOR信号通路相

关蛋白水平和活性。

2.3采用荧光素酶检测法测定各组细胞株的增殖活性。

预期结果：

本研究预计通过猪骨骼肌卫星细胞分离培养和体内转染技术，深入

解析IGF-ImTOR信号通路在猪骨骼肌卫星细胞增殖期生长差异中的调控

作用和机制。结果将从分子水平进一步揭示肌肉生长的分子机制，并且

为猪肉质的提高提供科学依据和实践指导。