DB22T 2599-2016 梅花鹿精液采集及冷冻技术规程.docxVIP

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备案号：54272-2017DB22吉林省地方标准

DB22/T2599—2016

梅花鹿精液采集及冷冻技术规程

Technicalspecificationofsemencollectingandfrozeninginsikadeer

2016-12-22发布2017-04-01实施

吉林省质量技术监督局发布

I

DB22/T2599—2016

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。

本标准起草单位：中国农业科学院特产研究所。

本标准主要起草人：赵伟刚、魏海军、许保增、杨镒峰、赵蒙、陈秀敏、曹新燕、鞠妍、薛海龙。

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梅花鹿精液采集及冷冻技术规程

1范围

本标准规定了梅花鹿精液采集前准备、稀释液配制、电刺激采精、精液处理及冷冻保存。本标准适用于梅花鹿精液采集及冷冻生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T5458液氮生物容器GB6935中国梅花鹿种鹿

GB18596畜禽养殖业污染物排放标准NY1181输精细管

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

电刺激采精Electricalstimulationejaculations利用电刺激采精仪获得公鹿精液的方法。

4采精前准备

4.1采精场所

采精场应设在距公鹿圈较近处，拨鹿安全方便，应宽敞、安静，地面清洁卫生。

4.2采精员准备

采精员应剪短指甲，更换好工作服和鞋帽，戴上工作手套。

4.3仪器设备

预先使冷藏柜平衡在4℃,恒温箱和水浴锅处于37℃工作状态,电刺激采精仪使用前应进行检查，观察指示器是否正确。

5稀释液

5.1稀释液推荐配方

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表5.1鹿冷冻精液稀释液推荐配方

成分

含量

Tirs

2.7g

柠檬酸

1.53g

葡萄糖

1.0g

甘油

6.0ml

双蒸水

定容至100.0mL

5.2稀释液配制方法

先用电子天平称取Tirs、柠檬酸和葡萄糖，放入三角烧瓶中，再把三角烧瓶放在电子天平上，归零后直接用三角烧瓶称取甘油，用量桶量取双蒸水，倒入三角烧瓶中，并摇晃使药品充分溶解，放入蒸锅内蒸汽灭菌30min，冷却后取出待用。使用前加入20%卵黄和青霉素、链霉素各10万单位，用磁力搅拌器充分搅拌均匀后放入3℃~5℃的冰箱中待用，放置时间不得超过24h。

6采精

6.1种公鹿的要求

种公鹿应符合GB6935的规定。

6.2采精方法

采用电刺激采精仪进行梅花鹿精液采集，电刺激采精程序参见附录B。

6.3采精频率

繁殖期内，成年公鹿每隔一周采精一次。

7精液处理

7.1精液品质评定

精液品质评定见表1。

表1精液品质评定参数表

项目

色泽

pH

密度

活率

畸形率

内容

乳（灰）白色或淡黄色

6.85～6.95

≥6×108个/mL

≥0.65

≤15%

7.2精液稀释、分装与平衡

7.2.1稀释

用37℃预热的稀释液对精液进行两次稀释。先进行半量稀释，10min后再稀释至最终倍数。

7.2.2分装

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冷冻精液剂型为0.25ml细管，细管应符合NY1181的要求。精液稀释10min后,用细管灌封仪进行分装、标记和封口。每支细管含有效精子数1000万～1500万。

7.2.3平衡

分装后的细管精液，用2层～3层干毛巾包裹后放入4℃冷藏柜中平衡3h～4h。

8精液冷冻

8.1冷冻方法

8.1.1程序冷冻仪冷冻

按照程序冷冻仪的说明进行操作。如果冻精细管数量不足时，要填充备用塑料细管和细管架以保持最佳冷冻曲线程序自动完成冷冻过程，确保冻精质量。

8.1.2广口冷冻罐冷冻

将平衡好的细管精液均匀铺于冷冻架上，使冷冻架与液氮面保持2cm～2.5cm的高度，冷冻温度控制在-120℃~-140℃,冷冻时温度回升的最高值不得高于-90℃,5min～8min后将冷冻架浸入液氮中。

8.2冻精检查与保存

8.2.1冻精检查

每批