分光光度计测定磷的含量doc .pdfVIP

分光光度计测定磷的含量〖实验目的〗：掌握抗坏血酸-氯化亚锡显色法测定磷含

量的原理。掌握分光光度计的使用方法。〖实验用品〗：仪器：721型分光光度

计、容量瓶、吸灵管、移液管、滴管。药品：4盐酸钼酸铵溶液：称取40克钼酸

铵（A.R.）溶于600ml浓HC1中，慢慢加入400ml水，混匀。溶液中HC1的

浓度为7.2摩尔每升。。2抗坏血酸溶液：称取0.5克抗坏血酸（A.R.）溶于25ml

去离子水中（新配），用浓HC1溶解，加去离子水稀释到0．5SnCl2溶液：称

取0.2克SnCl2（A.R.）。40ml（新配）标准磷溶液：称取KH2PO4（A.R.）

于100ml烧杯中，用少量去离子水溶解，定量转入250ml容量瓶中，稀释至刻度，

摇匀。此溶液每毫升含P2O51.0mg。吸取上述标准磷溶液5ml于250ml容量瓶中，

稀释至刻度，摇匀。此溶液为含P2O520.0mg/L的标准磷溶液。-1。材料：待

测磷溶液（约1mgL）〖实验原理〗：测定试液中的微量磷，常用钼蓝比色法。

根据所用还原剂的不同，钼蓝法一般可分为氯化亚锡法和抗坏血酸法2种。氯化亚

锡法灵敏度高，室温下可迅速显色，但颜色稳定时间33，且容易受Fe的干扰。

抗坏血酸钼蓝法具有颜色稳定时间长，Fe短（仅5分钟到20分钟）干扰小等优点，

但室温下反应速度慢，且不完全，必须用沸水浴加热，操作步骤繁琐。若用抗坏血

酸-–氯化亚锡比色法，即在加入SnCl2前，先加入少量抗坏血酸，不但可以消除大

量3Fe的干扰，增加稳定性，并能在室温下迅速显色。磷酸盐在酸性溶液中与钼

酸铵作用，生成黄色钼磷酸，其反应如下：PO412MoO427HH7PMo2O7

610H2O32该种黄色化合物遇到还原剂，如抗坏血酸、SnCl2等，可被还原成

钼蓝配合物，使溶液呈深蓝色。蓝色的深浅与磷的含量成正比。磷含量为0.5毫克

每升2.0毫克每毫升时服从郎-2伯比耳定律。SiO3会干扰磷的测定，它也与

钼酸铵生成黄色的H3SiMo2O76。并被还原为钼蓝，但可加酒石酸来控制

MoO4的浓度使它不与SiO3发生反应。22〖实验技术〗：实验室中用以测定有

色溶液的吸光度的仪器，常用的是721型分光光度计。721型分光光度计形如图

3.3.11所示。其使用方法如下：图3。3。111）仪器未接通电源时，电表指针位

于0刻度线上，否则可用电表上的校正螺丝进行调节。2）仪器的电源开关接

通，打开比色皿暗箱盖，选择需要的单色光波长和灵敏度，调节0电位器使电表

指0；然后合上暗箱盖，使光管受光，旋转100电位器，使电表指针指到满度（100）

附近；打开暗箱盖将仪器预热20分钟。3）放大器灵敏有5档，是逐步增加的，

1档最低。其选择原则是：在保证能使空白溶液良好地调节到100的情况下，尽

可能采用灵敏度较低的档，这样仪器具有较高的稳定性。一般可先置于1档，调

不到100时再增高一档。改变灵敏度后需要重新校正0和00。4）预热后，按

步骤（2）连续几次调整0和100旋钮，即可进行测定工作。5）如果大幅度改

变测试波长，在调整0和100旋钮后，应稍待片刻，待指针稳定后，重新校正0

和100，然后再进行测定工作。6）实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，将

仪器罩好。〖实验步骤〗：1、标准溶液系列的配制和测定-1分别准确吸取20.0mgL

P2O5标准溶液0.00ml，1.00ml，2.00ml，3.00ml，4.00ml，各加入约25ml去

离子水、滴2抗坏血酸和5ml45.00ml于6个有编号的50ml容量瓶中，10盐

酸钼酸铵溶液（此时溶液体积应保持在35ml以下，可调节加入去离子水的量，以

保持这。放置5分钟后，加入5滴0.5SnCl2稀释至刻度，摇匀。以1号瓶中

的溶液为空一体积）白，选用650nm波长的入射光和1cm的比色皿，调节分光光

度计透过光度读数为100，再分别测出各溶液的吸光度。2、试样溶液的配制和测

定按配制标准溶液系列的方法加入试剂显色、准确移取待测磷溶液5.00ml于

50ml容量瓶中，定容，并在