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乳腺癌细胞MDA-MB-231肺转移模型的建立及其评价

曹让娟;翟艳华;卿旭;刘雅文;朱筱娟

【摘要】目的:探讨用绿色荧光蛋白(GFP)标记的乳腺癌细胞MDA-MB-231建立

可量化评估的自发性肺转移和实验性肺转移动物模型,为研究乳腺癌的转移机制提

供依据.方法:采用慢病毒载体介导的病毒包装体系,获得稳定表达GFP的细胞系

MDA-MB-231-GFP,通过皮下注射方式将细胞接种于Balb/C裸鼠皮下,建立自发

性肺转移模型,通过尾静脉注射方式将细胞接种到重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠体

内,建立实验性肺转移模型,分别于8周和5周后处死小鼠,取肺组织于体视显微镜下

观察.结果:自发性肺转移小鼠接种细胞8周后,原位形成直径约为15mm的肿瘤块;

处死小鼠后肺部大体标本未见结节状转移灶,但488nm激发光下见转移灶呈绿色

点状分布.实验性肺转移小鼠接种细胞5周后处死小鼠,肺部形成的转移灶肉眼不可

见,但在488nm激发光波长下同样呈现绿色点状分布.肺转移灶易于观察和统计.结

论:成功建立了可以量化的MDA-MB-231细胞肺转移动物模型.

【期刊名称】《吉林大学学报(医学版)》

【年(卷),期】2011(037)003

【总页数】6页(P403-406,封2,后插1)

【关键词】乳腺肿瘤;慢病毒体系;肺转移;动物模型

【作者】曹让娟;翟艳华;卿旭;刘雅文;朱筱娟

【作者单位】东北师范大学遗传与细胞研究所神经可塑性实验室,吉林,长

春,130024;东北师范大学遗传与细胞研究所神经可塑性实验室,吉林,长春,130024;

东北师范大学遗传与细胞研究所神经可塑性实验室,吉林,长春,130024;吉林大学公

共卫生学院流行病与卫生统计学教研室,吉林,长春,130021;东北师范大学遗传与细

胞研究所神经可塑性实验室,吉林,长春,130024

【正文语种】中文

【中图分类】Q813.11;R73-3

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,乳腺癌转移和复发是导致患者死亡的主要原因

[1-2]。对乳腺癌发病或转移机制的研究需要建立可靠的实验动物模型,以便模拟

体内过程,为进一步的临床治疗提供理论依据。肺组织因含有丰富的血氧供应,常

常是恶性肿瘤易于侵犯的器官,因此阻断肺转移过程是提高乳腺癌患者生存质量的

重要环节,建立量化的肺转移模型尤为重要。肺转移动物模型可分为自发性和实验

性肺转移动物模型:将乳腺癌细胞接种到免疫缺陷小鼠乳腺脂肪垫或皮下,由于肿

瘤的生长而形成的远端肺转移为自发性肺转移;将细胞通过尾静脉注射到免疫缺陷

小鼠体内而形成的肺转移为实验性肺转移[3]。MDA-MB-231细胞株是常用于研

究乳腺癌的主要细胞系之一[4],该细胞株易于发生肺转移,但主要为肺部弥散性

浸润,不形成结节状转移病灶,肉眼不可见,难以量化评价,限制了其在乳腺癌转

移研究中的应用[5]。如何量化肺转移灶是研究乳腺癌转移亟待解决的问题。本研

究拟采用稳定表达绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)的细胞系

MDA-MB-231-GFP,建立自发性肺转移模型和实验性肺转移模型,使肺转移灶清

晰可见,以期为研究乳腺癌转移机制奠定实验基础。

1材料与方法

1.1动物Balb/C裸鼠由北京华阜康动物中心提供,重症免疫缺陷(SCID)小鼠由上

海斯莱克实验动物中心提供,雌性,4~6周,无特定病原体(SPF)级饲养。

1.2细胞株和菌种HEK293FT细胞、HeLa细胞和乳腺癌MDA-MB-231细胞购

于上海生命科学学院细胞库。细胞于DMEM培养基(美国Sigma公司)和10%的

超级新生牛血清(上海依科赛生物制品有限公司)、5%CO2、37℃条件下培养,细

胞融合度为90%时进行传代。慢病毒体系的pDSL_hpUGIP-GFP、psPAX2﹑

pMD2载体、stb13菌株﹑TOP10菌株均购于Invitrogen公司。

1.3慢病毒包装及病毒滴

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