产蛋白酶的海洋放线菌的初步研究【开题报告】 .pdfVIP

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开题报告

生物科学

产蛋白酶的海洋放线菌的初步研究

一、综述本课题国内外研究动态,说明选题的依据和意义

蛋白酶是一类很重要的水解酶类。自1945年瑞士Dr.Jaag等发现微生物碱性蛋白

酶以来,蛋白酶由于其广泛的用途,已成为当前国内外研究的热点.。

蛋白酶是一类常用的工业和研究用酶。它在洗涤剂、制革脱毛、生丝脱胶、

有机合成、酒类澄清、明胶及蛋白胨生产、肉质嫩化、医葯等方面广为应用,在酶

制剂市场占65%的份额。据估计,当前世界工业用酶的市场价值约有25亿美元,其中

蛋白酶销售额可占酶制剂总销售额的60%。

微生物是蛋白酶最重要的来源,所产的蛋白酶较动物、植物来源的蛋白酶易于分

离、纯化。放线菌是微生物的一种,主要从泥土、泉水、土地、土壤及海水附近等环境

中分离得到,与生命起源、系统进化关系密切,具有独特的基因类型、特殊的生理机制及

特殊的代谢产物,为地球上的生命现象。

海洋特有的环境造就了海洋生物的多样性与独特性,低温、高压、高盐量使得海

洋生物中一些酶、激素以及其他代谢产物有着极高的活性。蛋白酶是加酶洗涤剂常用

的蛋白酶制剂,目前在我国虽然已有了一定规模的蛋白酶生产,但均未达到使用要

求,每年仍需从国外进口大量的蛋白酶。

生产蛋白酶的微生物生长条件与海洋环境非常相似,发达国家已有了利用海洋微

生物生产蛋白酶的先例。根据这一经验开始从深海鱼类、贝类、海泥以及海水中筛

选、提纯能产生高效蛋白酶的放线菌株,由于真菌,细菌产生的蛋白酶研究已经很广

泛,而对放线菌产蛋白酶的研究相对较少,本研究从舟山沿海海水中分离出几株蛋白

酶产生菌,并对其生理生化特性以及酶活力进行了初步研究.。

二、研究的基本内容,拟解决的主要问题:

本实验通过按照实验设计步骤从海水中筛选出可以产蛋白酶的放线菌,并对获得

的放线菌进行初步研究,如借助显微镜对其进行形态观察以及酶活力的测定。

三、研究步骤、方法及措施:

通过产蛋白酶的海洋放线菌的筛选方法,筛选出产蛋白酶的海洋放线菌,并对其

进行形态观察以及酶活力的测定。

1.采样:采集海水及海泥,将其按一定比例稀释。

2.样品处理:将稀释液涂布在高氏一号培养基上25摄氏度培养。

3.菌株纯化:培养一段时间后从培养基上挑选出菌落与高氏一号上划线分离纯

化,得到的菌株转接于平板和试管。

4.酶活测定:以酪蛋白为底物的紫外分光光度法。

四、参考文献

[1]吴士筠,周岿,张凡等.酶工程技术[M].武汉:华中师范大学出版社.2009.

[2]ChristensenJE,DudleyEG,PedersonJA.Peptidasesandaminoacidcatabolisminlactic

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[3]McCartneyAL.Applicationofmolecularbiologicalmethodsforstudyingprobioticsand

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[4]MarcoV,RobertoR,RalfZ.SpecificIdentificationandTargetedCharacterizationof

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Microbiology,2003,82:163-72.

[6]李闻欣,张晓镭,强西怀.绿色制革与皮革化学品[J].皮革化工,2001,18(5):5-7.

[7]颜子颖,关国雄.微生物发酵生产药用弹性蛋白酶[J].中国医药工业杂

志,1991,22(10):469-472.

[8]刘小杰,陈启和.弹性蛋白酶的研究进

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