金线莲繁育技术规程.docxVIP

1

金线莲繁育技术规程

1范围

本文件规定了金线莲繁育技术的术语和定义、金线莲原植物、选种、留种、组培苗培育、组培苗出瓶分级标准、炼苗、种植环境、种植设施、基质、管理、病虫害防治及产品采收与产地加工的技术要求。

本文件适用于广东省金线莲适生地区，以全草药食兼用为目的的人工种植与推广。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB3095环境空气质量标准

GB5084农田灌溉水质标准

GB15618土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准（试行）

GB/T19630-2019有机产品生产、加工、标识与管理体系要求

中药材生产质量管理规范（试行）（国家药品监督管理局局令第32号，2002）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

蒴果

由两个或多个心皮形成的开裂干果。金线莲蒴果中具有大量无胚乳粉末状的种子。

3.2

原球茎

由金线莲不同部位如种子、茎尖、茎段等诱导产生，具有发育潜能的细胞团。

3.3

不定芽

凡从叶、根、或茎节间或是离体培养的原球茎、愈伤组织等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽。

3.4

2

T/XXXXX004-XXXX

丛生芽

不定芽经增殖培养形成的群体丛生芽苗。

3.5

基质

种植中用来固定植株及贮存植物所需水分、养分的材料。金线莲种植常采用的基质有腐殖土、草炭土、碎树皮、碎树叶等按一定比例配制。

4选种和留种

4.1选种

本文件所指的金线莲原植物包括兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）的3个品种，即兴仁金线兰（AnoectochilusxingrenensisZ.H.TsietX.H.Jin）、金线兰（Anoectochilusroxburghii

（Wall.）Lindl.）、台湾银线兰（AnoectochilusformosanusHayata），经过鉴定确认，鉴定方法见附录A。

4.2留种

留种应选择植物形态特征典型，植物之间形态差异小，长势均匀，生长健壮的植株进行人工授粉结实获得的蒴果。

4.2.1授粉

盛花期进行人工授粉，采用异株异花授粉，母本在授粉后立即套袋，挂牌标记。人工授粉只能在同一种内进行。

4.2.2结实

授粉成功，子房开始膨大时进行疏果，每株留果2～3个；蒴果成熟时，选择饱满的果实采收备用。

4.2.3蒴果保存

留种蒴果置于冰箱4℃保存备用。

5组培苗培育

5.1种子无菌培养

5.1.1蒴果处理与播种

蒴果表面先用清水清洗干净，放在75％酒精里浸泡3分钟，在酒精灯上快速烧干表面酒精，剖开蒴果，将种子播于培养基上，40天左右种子开始膨大，通过种子萌发，经培养获得大量实生苗。

5.1.2种子萌发培养基

1/2MS+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。

3

5.1.3增殖分化

种子萌发后适时转接，进行增殖分化培养。

5.1.4增殖分化培养基

MS+(1.0～2.0mg/L)6-BA+(0.1～0.2mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。

5.1.5壮苗生根

将分化长至2cm～3cm的小苗适时转接，进行壮苗生根培养。

5.1.6壮苗生根培养基

MS+（0.5～1.0mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。

5.2丛生芽培养

5.2.1外植体获取

选择健壮的种植植株或野生植株的茎段作外植体，也可从无菌瓶苗中选择外植体。

5.2.2外植体处理

种植或野生植株金线莲用自来水冲洗干净，清理叶、叶苞鞘、根，用肥皂水浸泡20min，流水冲洗30min，在超净工作台上用75%酒精消毒30s，后用0.1%升汞消毒10min，再用无菌水洗5次，无菌滤纸吸干水分，将植株切为0.5cm长带节的茎段备用。无菌瓶苗可直接在超净工作台上取出，无菌操作，将植株切为0.5cm长带节的茎段备用。

5.2.3不定芽诱导与增殖

将带腋芽的茎段接种于不定芽诱导与增殖培养基中，经继代增殖培养，形成大量丛生芽。

5.2.4不定芽诱导与增殖培养基

MS+(1.0～2.0mg/L)6-BA+(0.1～0.2mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+0.8%琼脂，pH5.8。

5.2.5壮苗生根

当丛生芽长至2cm～3cm时，转入壮苗生根培养。

5.2.6壮苗生根培养基

MS+（0.5-1.0mg/L)NAA+10%马铃薯原汁+3%蔗糖+