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ICS
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内蒙古自治区地方标准
DB15/T××××—××××
甜菜子叶节遗传转化技术规程
Technicalspecificationsforgenetictransformationofsugarbeetcotyledonnodes
(征求意见稿)
××××-××-××发布××××-××-××实施
内蒙古自治区市场监督管理局发布
DB15/T××××—××××
前 言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。
本标准由自治区农业标准化技术委员会(SAM/TC20)归口
本文件起草单位:内蒙古农业大学
本文件主要起草人:李宁宁、李国龙、孙亚卿、张少英、郭晓彤、李悦、张子健、王帅、徐燕妮。
I
DB15/T××××—××××
甜菜子叶节遗传转化技术规程
1范围
本文件确立了培养基、灭菌、无菌苗培养、侵染液制备与子叶节预培养、遗传转化、生根培养、移
栽和目的基因检测等技术要求。
本文件适用于农杆菌介导甜菜子叶节遗传转化技术操作的全过程。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB19176-2010糖用甜菜种子
DB15/T2044—2020农杆菌介导甜菜遗传转化技术规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
甜菜遗传转化sugarbeetgenetictransformation
将外源基因转移到甜菜体内并稳定整合、表达和遗传,从而使受体甜菜植株体现转移基因的特征的
过程。
3.2
农杆菌侵染infection
农杆菌侵入并感染甜菜外植体的过程。
3.3
子叶节cotyledon-node
子叶节一般是指子叶着生的部位。组织培养时,有时也将有子叶着生的外植体节段叫做子叶节。
4培养基
4.1萌发培养基
1
DB15/T××××—××××
用于萌发甜菜种子,萌发培养基成分包括:1L自来水+1.0mg/L6-BA+8.0g/L琼脂,pH为5.8。
4.2悬浮培养基
用于农杆菌浸染液的制备,悬浮液培养基成分包括:1/2MS+50g蔗糖+5.0gMES+0.02%silwet-77,
pH为5.8。
4.3预培养基
用于甜菜子叶节的预培养,预培养基成分包括:MS+30g蔗糖+1.0mg/L6-BA+0.2g酪蛋白+7.0g/L
琼脂,pH为5.8。
4.4共培养基
用于甜菜子叶节农杆菌浸染后的共培养,预培养基成分包括:MS+30g蔗糖+1.0mg/L6-BA+0.2g
酪蛋白+100μMAS+7.0g/L琼脂,pH为5.8。
4.5抑菌培养基
抑菌培养基成分包括:MS+30g蔗糖+1.0mg/L6-BA+0.25mg/LNAA+0.5mL/LPPM+8.0g/L琼脂
+400mg/mL特美汀,pH为5.8。
4.6
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