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原核表达实验报告

一、实验目的

本实验旨在通过原核表达系统将目标蛋白在大肠杆菌中进行表达，并对其进行纯化和鉴

定。

二、实验材料

1.目标蛋白基因克隆质粒；

2.大肠杆菌感受态细胞；

3.抗生素（如氨苄青霉素）；

4.IPTG诱导剂；

5.SDS凝胶电泳试剂盒；

6.蛋白质纯化试剂盒。

三、实验步骤

1.大肠杆菌转化：将目标蛋白基因克隆质粒转化到大肠杆菌感受态细胞中，加入抗生

素（如氨苄青霉素）筛选阳性克隆。

2.诱导表达：将阳性克隆的大肠杆菌接种到含有IPTG诱导剂的培养基中，使其表达目

标蛋白。

3.收集菌体：培养一定时间后，收集大肠杆菌菌体。

4.裂解菌体：将收集到的大肠杆菌菌体进行裂解，释放目标蛋白。

5.纯化目标蛋白：使用蛋白质纯化试剂盒对目标蛋白进行纯化。

6.鉴定目标蛋白：通过SDS凝胶电泳分析目标蛋白的表达情况和纯度。

四、实验结果与分析

1.大肠杆菌转化结果：通过抗生素筛选，获得阳性克隆。

2.诱导表达结果：在含有IPTG诱导剂的培养基中，目标蛋白得到了有效表达。

3.菌体收集结果：成功收集到大肠杆菌菌体。

4.裂解菌体结果：菌体裂解后，释放出目标蛋白。

5.纯化目标蛋白结果：通过蛋白质纯化试剂盒，成功纯化了目标蛋白。

6.鉴定目标蛋白结果：通过SDS凝胶电泳分析，目标蛋白得到了高纯度的表达。

五、实验结论

本实验通过原核表达系统成功表达了目标蛋白，并通过纯化和鉴定获得了高纯度的目标

蛋白。这为进一步研究该蛋白的功能和应用提供了基础。