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酶抑制显色法操作过程与优点

一、酶抑制分光光度法原理

乙酰胆碱酯酶水解后，水解产物可与显色剂反应产生颜色，有机

磷和氨基甲酸酯类农-药可以抑制乙酰胆碱酯酶的活性，使这种酶不

能被水解，从而无显色反应。在溶液中加入乙酰胆碱酯酶和显色剂，

用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农-药残留是否存在。在溶液中反应

后，用分光光度计测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，以此判

断蔬菜中含有机磷和氨基甲酸酯类农-药残留的情况。

二、酶抑制分光光度法方法原理

乙酰胆碱酯酶水解后，水解产物可与显色剂反应产生颜色，有机

磷和氨基甲酸酯类农-药可以抑制乙酰胆碱酯酶的活性，使这种酶不

能被水解，从而无显色反应。在溶液中加入乙酰胆碱酯酶和显色剂，

用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农-药残留是否存在。在溶液中反应

后，用分光光度计测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，以此判

断蔬菜中含有机磷和氨基甲酸酯类农-药残留的情况。

三、乙酰胆碱酯酶抑制法(酶法)的作用原理

从生物化学的角度看，有机磷农-药和氨基甲酸酯农-药与乙酰胆

碱是竞争性作用于胆碱酯酶的，即胆碱酯酶可以与乙酰胆碱结合，催

化乙酰胆碱生成乙酰和胆碱，另一方面，如果胆碱酯酶与有机磷农-

药结合，就阻断了反应的进行。根据这个原理，就可以利用胆碱酯酶

的催化反应的抑制法，设计一种通过颜色变化的直观的检测方法，来

快速检测有机磷农-药和氨基甲酸酯农-药的残留情况。因此，生物化

学法(酶法)就是利用某种酶受影响的程度来反映农产品中农-药残留

量。

四、优缺点：

优点：在于简单方便，快捷、成本低廉。整个检测过程只需30

分钟左右，它可以作为传统仪器分析方法的有益补充，针对市场、农

场蔬菜农-药残留量进行快速筛选监测，保证上市蔬菜食用的相对安

全性。

缺点：酶试剂易失活，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重

复性不好，实际应用中的确认率大约为60%~70%左右;存在检测盲区，

只能检测有机磷和氨基甲酸酯两类农-药，不能检测有机氯类、菊酯

和其它类别的剧毒农-药;不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、番茄、胡

萝卜、茭白、蘑菇、花椒等14种容易出现假阳性的农产品;需要对检

测人员进行专门培训，否则将会对出现的问题无法正确处理或判断，

得出错误的结果。