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目视比色法和分光光度法的分析和比较

2015年12月5日

龙浪李珂璇王宇鑫李嘉浩程卫东王佳佳

临床医学院

指导教师：徐尧

一、摘要

本讨论报告通过分析和比较目视比色法和分光光度法两种比色法的主要优

缺点，即目视比色法操作简便但精度较低，分光光度法精确度较高但对溶液的性

质要求较高；并且结合实例说明两种比色法各自的适用范围和浓度限制，即两种

比色方法分别在光的波长、物质的组分、以及对朗伯-比尔定律的符合情况上有

不同的适用范围，并给出了适用的吸光度范围（0.2-0.8）和浓度范围。由此针对

不同情况给出了不同的选择方案。这对实际的研究和生产生活具有指导性的意义。

二、前言

在确定有色溶液待测组分含量时，常常可以通过比较和测量溶液的颜色来进

行，这种方法叫做比色法。早在19世纪30-40年代，比色法就开始作为一种定

量分析的方法被应用到研究和生产中。常用的比色法有目视比色法和分光光度法

两种，其中前者主要通过眼睛观察得出结论，后者借助光电比色计进行。由于这

两种比色方法的实际应用非常广泛，因此分析和比较两种方法对于方法的优化显

得尤为重要。

三、内容

（一）两种比色方法优缺点比较

1.目视比色法

1）优点

（1）比色时操作简便，成本较低

相比分光光度法，目视比色法不需要动用分光光度计，只需要几个比色管便

可以完成测定，因此显得仪器设备简单，操作简便，使用成本低。同时节省了电

能，有利于能源的节约和保护。在分析大批试样时，其优势就显得更加明显，大

大节省了人力、物力、财力以及测定消耗时间。

在本实验中，我们仅需配置5个标准溶液，便可直接在比色管架上进行比较，

与分光光度法中所需的多次清洗比色皿的操作要求相比比较简易。

（2）适用范围较广，可用于不严格符合Lambert-Beer定律的情况

[2]

目视比色法是通过比较通过光的强度来测定组分含量，可以在白光下进行，

因此对于有些不严格符合Lambert-Beer定律的显色反应也是适用的。例如在用碘

量比色法测定油脂中过氧化值时，碘和淀粉反应的特征蓝色只有在含碘量在

[6]

2~10μg时才较为严格地符合Lambert-Beer定律，因此只要反应产生的碘稍稍

过量或不足，使用分光光度法测定就会产生较大误差，只能使用目视光度法。

本实验中，目视比色法实际上测量的是通过Fe(SCN)溶液的光的强度，而

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在分光光度法中实际测定的是某一单色光（如蓝色）被吸收的情况。

1）缺点

（1）精确度较差

目视比色法主要依靠人的眼睛来观察颜色深度，不可避免地会受到观测者主

观因素的影响，因此其准确性自然会受到显著影响。一般来说，目视比色法的相

对误差为5%-10%。

-3

通过询问助教老师，我们知道本次实验中所测未知液浓度为1.5×10mg/mL。

由此，我们比较了教学网上本次实验的数据，对于233组未知液浓度的有效数据，

-3

一共有96组数据目视比色法得到的浓度范围为0-2.00×10mg/mL，统计中我们

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发现大量同学的浓度范围在0-8.00×10mg/mL，这显然是没有换算为原溶液浓

度所致，故这部分同学也认为读数正确（而计算错误）。两部分同学总计为126

名，比例达到54.1%。对于同样的未知液，我们发现不同组的结果有较大差距，

这同样说明了目视比色法有较大的主观性和偶然性，只能用于精确度要求不高的

场合。

另外，由于人眼