siRNA干扰相互作用蛋白1表达抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移 .pdfVIP

siRNA干扰相互作用蛋白1表达抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁

移

向伟;漆松涛;刘亚伟;李和珍;周强;易国仲;陈子阳;严乐

【摘要】ObjectiveToinvestigatetheeffectofsmallinterferingRNA

(siRNA)-mediatedsilencingofPC4andSFRS1interactingprotein1(PSIP1)

oninvasionandmigrationofhumangliomaU87cells.MethodsChemically

synthesizedsiRNAtargetingPSIP1genewastransfectedintoU87cellsvia

lipofectamine,andthegenesilencingeffectwasdeterminedusingreal-

timePCR.Thechangesintheinvasionandmigrationabilitiesofthe

transfectedcellswereassessedwithTranswellassayandwoundhealing

assay,respectively.Westernblottingwasusedtoanalyzetheexpressionof

N-cadherin,β-cateninandthetranscriptionfactorSlug.ResultsThemRNA

andproteinlevelofPSIP1wassignificantlyreducedinU87cellsafter

transfectionwithPSIP1siRNA(P0.0001).PSIP1knockdowninU87cells

resultedinsignificantsuppressionofcellinvasionandmigrationabilities

(P0.01)andalsoreducedN-cadherin,β-cateninandSlugexpressions.

ConclusionsSilencingofPSIP1impairstheinvasionandmigrationabilities

ofgliomacellsandlowerstheexpressionsofN-cadherin,β-cateninand

Slug,suggestingthatPSIP1mayregulateSlugbyclassicalWnt/β-catenin

signalingpathwaytomodulateepithelial-mesenchymaltransitionand

promotetheinvasionandmigrationofgliomacells.%目的：探讨小干扰

RNA（siRNA）干扰降低PC4和SFRS1相互作用蛋白1（PSIP1）的表达对人胶

质瘤U87细胞侵袭和迁移的影响并初步探讨其机制。方法采用化学合成靶向

PSIP1的siRNA，脂质体法转染U87细胞，用Real-timePCR检测RNA干扰效

率；Transwell侵袭实验测细胞侵袭能力；划痕实验检测其迁移能力；干扰PSIP1

表达后，Westernblot检测间质细胞来源的N-cadherin、β-catenin蛋白和转录

因子Slug的表达。结果PSIP1-siRNA转染胶质瘤U87细胞后，PSIP1的mRNA

水平及蛋白水平明显下降（P0.001），U87细胞侵袭和迁移能力下降，与阴性

转染组及未转染组相比差异有统计学意义（P0.001，P0.001），Western

blot显示，间质细胞来源的N-cadherin、β-catenin蛋白表达量降低，同时与上

皮间质转化（EMT）相关的转录因子Slug的表达降低。结论在胶质瘤中，抑制

PSIP1的表达可抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移，N-cadherin、β-catenin蛋白和转

录因子Slug的表达量降低，提示PSIP1可通过调控经典Wnt/β-catenin信号通

路来调节