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HBVx基因真核表达载体的构建及对肝癌细
胞恶性表型的影响
作者：郭双平王文亮翟宇强
【关键词】乙型肝炎病毒x基因
关键词:乙型肝炎病毒x基因;真核表达载体;肝癌细胞
摘要:目的构建乙型肝炎病毒x基因真核表达载体并在肝癌
细胞中表达，以研究其对肝癌细胞恶性表型的影响.方法应用PCR、
基因克隆等方法构建乙型肝炎病毒x基因真核表达载体
pcDNA3.1-HBX，用基因转染的方法将pcD-NA3.1-HBX转染入肝癌细
胞HCC-9204，筛选稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白的肝癌细胞.MTT比
色实验、平板集落形成实验检测肝癌细胞恶性表型.结果成功构建了
乙型肝炎病毒x基因真核表达载体pcDNA3.1-HBX并获得了稳定表达
乙型肝炎病毒X蛋白的肝癌细胞系HCC-9204细胞克隆，且MTT比
色实验、平板克隆形成实验显示稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白的肝癌
细胞恶性度增高.结论乙型肝炎病毒X蛋白具有生长因子样作用，可
刺激肝癌细胞生长，在肝癌细胞中稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白可增
加肝癌细胞恶性表型.
Keywords:HBVxgene;eukaryoticexpression
vector;hepa-tocellularcarcinomacell
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Abstract:AIMToconstructandexpresstheeukaryotic
phenotypeofhepatocellularcarcinomacells.METHODSPolymerasechain
reaction（PCR）andothermolecularbiologicalmethodswereusedto
constructtheeukaryoticexpressionvectorofHBVxgene
pcDNA3.1-HBX.Thengenetransfectionmediatedbythelipofectamine
humanhepatocellularcarcinomacelllineHCC-9204.Theselectivemedium
containingG418wasusedtoselectthecellcloneswhichexpresstheX
proteinofHBVconstantly.MTTcolorimetricanalysisexperimentand
malignantphenotypeandgrowthofhepatocel-lularcarcinoma
cells.RESULTSTheeukaryoticexpressionvectorofHBVxgenewas
successfullyconstructed.ThecellcloneswhichexpressedtheXprotein
constantlywereob-tainedbytheselectivemediumcontainingG418.Cells
whichconstitutivelyexpressedtheXproteinhadarelativelyhigher
malignantphenotype.CONCLUSIONTheXproteinhasgrowthfactor-like
andenhanceitsmalignantphe-notype.
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