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金丝桃素抗乙型肝炎病毒作用及机制的体外研究

蓝天云;范红;陈勇彬;杨翠萍;赵兴旺;李岩

【摘要】目的：从细胞水平评价金丝桃素（HY）的抗乙型肝炎作用，并初步探寻

其药物作用靶点。方法选择可分泌乙型肝炎病毒的肝细胞株HepG2．2．15为实

验对象，HY为HY组，拉米夫定（3TC）为3TC组，去离子水为空白对照组，对

细胞进行分组给药。给药72h后，采用Southern印记杂交及荧光定量PCR检

测病毒HBV-DNA的复制水平；ELISA检测HBV表面抗原（HBsAg）和HBVe

抗原（HBeAg）的抑制率；采用Northernblot与荧光定量PCR检测pgRNA

的表达水平；Westernblot及荧光定量PCR检测调控因子肝细胞核因子3

（HNF3β）、肝细胞核因子4（HNF4α）、过氧化物酶体增殖激活受体／视黄受

X受体（PPARα／RXRα）的表达水平。结果与空白对照组相比，HY组与3TC组

对HepG2．2．15细胞中的HBVDNA及HBsAg、HBeAg的表达有明显抑制作

用（P＜0．05）。与空白对照组相比，HY可显著减少pgRNA的表达（P＜

0．05），而3TC无明显变化（P＞0．05）。与空白对照组和3TC组相比，HY

对调控因子HNF3β与HNF4α的表达有显著影响（P＜0．05），但对PPARα

和PXRα的表达无影响（P＞0．05）。结论HY具有强效抗乙型肝炎病毒作用，

且其可使负向调控因子HNF3β的表达升高并降低正向调控因子HNF4α的表达。

提示其药物作用靶点可能为pgRNA。%ObjectiveToevaluatetheanti-HBV

effectofhypericinfromthecellularlevelandtopreliminarilyexploreits

po-tentialdrugtargetpoint.MethodsLivercelllineHepG2.2.15cells

secretingHBVparticleswereselectedastheexperimentalob-

jects.HypericinservedastheHYgroup,lamivudinewastakenas3TCgroup

anddeionizedwaterastheblankcontrolgroup.Thecellsweregrouped

andadministrated.TheHBV-DNAcopylevelwasmeasuredat72hafter

medicationbySouthernblotandfluo-rescentquantitativePCR;the

inhibitionrateofHBsAgandHBeAgwasdetectedbyusingELISAassay;the

pgRNAexpressionlevelwastestedbyusingNorthernblotandfluorescent

quantitativePCR;WesternblotandfluorescentquantitativePCRwere

adoptedtodetecttheexpressionofregulatoryfactorsincluding

HNF3β,HNF4α,PPARαandRXRα.ResultsComparedtotheblankcontrol

group,bothhypericinandlamivudinehadsignificantinhibitingeffecton

HBVDNAandexpressionlevelofHBsAgandHBeAginHepG2.2.15cells(P

0.05).HypericincouldsignificantlydecreasethepgRNAexpression

comparedwiththeblankcontrolgroup(P0.05),whilelamivudinehadno

obvious