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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书
(10)申请公布号CN105505909A
(43)申请公布日2016.04.20
(21)申请号CN201511033116.6
(22)申请日2015.12.31
(71)申请人安徽丰原发酵技术工程研究有限公司
地址233030安徽省蚌埠市淮上区怀五路南侧
(72)发明人秦晴许鹏冯杰杨为华纪传侠娄雯
(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司
代理人王文君
(51)Int.CI
C12N9/90
C12P7/46
权利要求说明书说明书幅图
(54)发明名称
一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异
构酶酶活力的方法
(57)摘要
本发明涉及酶化学领域，具体公开
一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异构酶酶
活力的方法，具体为在马来酸顺反异构酶
参与的酶解反应体系中添加岩藻糖。本发
明通过实验优化了岩藻糖的添加浓度，使
最大程度的提高马来酸顺反异构酶的酶活
力。本发明所述方法简单易行，在马来酸
顺反异构酶反应过程中具有可以节约酶用
量，提高反应效率的优点。
法律状态
法律状态公告日法律状态信息法律状态
权利要求说明书
1.岩藻糖在提高马来酸顺反异构酶酶活力中的应用。
2.一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异构酶酶活力的方法，其特征在于，
在马来酸顺反异构酶参与的酶解反应体系中添加岩藻糖。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述岩藻糖相对于
酶解反应体系的添加浓度为0.3～1.0mmol/L，优选0.5mmol/L。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述酶解反应体系
中，马来酸顺反异构酶的浓度为20～200U，反应底物的浓度为
100～2500mmol/L；优选马来酸顺反异构酶的浓度为25～50U，反应底
物的浓度为100～1000mmol/L。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述反应底物为马
来酸或马来酸盐。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述岩藻糖为固体
或水溶液。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述酶解反应条件
为20～50℃，pH3.5～9.0；优选37℃，pH8.4。
8.根据权利要求5～7任一项所述的方法，其特征在于，所述马来
酸顺反异构酶来源于假单胞菌属(Pseudomonas)、产碱杆菌属
(Alcaligenes)、沙雷氏菌属(Serratia)、变形杆菌属(Proteus)、节杆菌属
(Arthrobacter)或含有马来酸顺反异构酶基因或其突变体基因的工程
菌的培养物或分泌物。
9.一种以马来酸为原料生产富马酸的方法，其特征在于，包括如下步
骤：
1)将比活为50U/mg的马来酸顺反异构酶酶液，用缓冲液稀释至
pH8.4，加入pH8.4浓度为1mol/L的马来酸溶液中；
所述马来酸顺反异构酶酶液与马来酸溶液的体积比为9:1；
2)加入岩藻糖，使岩藻糖相对于整个反应体系的浓度为
0.3～1.0mmol/L；
3)35～40℃反应15～30min，用0.45μm有机滤膜过滤，收集滤液
进行处理，得到富马酸。
10.根据权利要求2～8任一项所述的方法，其特征在于，所述缓
冲液为pH8.4，50mmol/L的NaHPOsub4/sub-
KHsub2/subPOsub4/sub缓冲液。
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