诱导小鼠成肌细胞肌萎缩的抵抗和再生作用及其机制 .pdfVIP

第49卷第6期吉林大学学报（医学版）Vol.49No.6

2023年11月JournalofJilinUniversity（MedicineEdition）Nov.20231457

[文章编号]1671‑587X(2023)06‑1457‑09DOI：10.13481/j.1671‑587X

lncRNAGPRC5D-AS1对地塞米松诱导小鼠成肌细胞肌萎缩的

抵抗和再生作用及其机制

张瑞鹏,李杰

（吉林大学第一医院干部病房，吉林长春130021）

［摘要］目的目的：探讨长链非编码RNA（lncRNA）GPRC5D-AS1对地塞米松诱导的小鼠成肌细胞

肌萎缩的抵抗和再生作用，并阐明其作用机制。方法：选取对数生长期C2C12细胞，检测0、25、

50、75、100、200和400mg·L－1地塞米松诱导24、48和72h后C2C12细胞存活率，筛选肌萎缩模

型诱导的最佳作用剂量和时间。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测C2C12细胞中lncRNA

GPRC5D-AS1表达水平以验证细胞模型。将C2C12细胞分为正常组、模型组、lncRNAGRPC5D-

AS1-NC组和lncRNAGRPC5D-AS1-OE组，RT-qPCR法检测各组细胞中lncRNAGPRC5D-AS1表达

水平，流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细

胞中谷胱甘肽过氧化酶4（GPX4）、铁离子（Fe2+）和丙二醛（MDA）水平，透射电镜观察各组细胞

线粒体超微结构表现，免疫荧光法检测各组细胞中成肌分化蛋白（MyoD）表达情况，Western

blotting法检测各组细胞中铁死亡相关蛋白表达水平。结果结果：100mg·L－1地塞米松诱导48h时造模效

果最佳。与正常C2C12细胞比较，100mg·L－1地塞米松诱导48h后C2C12细胞中lncRNAGPRC5D-

AS1表达水平降低（P0.05），证实lncRNAGPRC5D-AS1在肌萎缩模型中有调控作用。RT-qPCR

法检测，与正常组比较，模型组细胞中lncRNAGRPC5D-AS1表达水平降低（P0.05）；与模型组

和lncRNAGRPC5D-AS1-NC组比较，lncRNAGRPC5D-AS1-OE组细胞中lncRNAGRPC5D-AS1表

达水平升高（P0.05）。流式细胞术检测，与正常组比较，模型组细胞中ROS水平升高（P0.05）；

与模型组和lncRNAGRPC5D-AS1-NC组比较，lncRNAGRPC5D-AS1-OE组细胞中ROS水平降低

（P0.05）。ELISA法检测，与正常组比较，模型组细胞中Fe2+和MDA水平升高（P0.05），

GPX4水平降低（P0.05）；与模型组和lncRNAGRPC5D-AS1-NC组比较，lncRNAGRPC5D-AS1-

OE组细胞中Fe2+和MDA水平降低（P0.05），GPX4水平升高（P0.05）。透射电镜观察，正常

组细胞外形圆整，大小正常，膜上绒毛丰富，线粒体细胞器形态正常；模型组细胞中线粒体数量减

少，胞浆颗粒化，线粒体结构模糊肿胀并出现典型铁死亡相关现象；lncRNAGRPC5D