第十一章高效液相色谱法教材.ppt

*1.外标法（一）定量分析方法*以待测组分和内标物的峰高比或峰面积比求算试样含量的方法。（1）内标校正曲线法：2.内标法*（2）内标对比法（3）校正因子法*(ms)样品—样品溶液中内标物的含量；(ms)对照—对照品溶液中内标物的含量；w—平均片重(或丸重)；m—取样量；(Ai/As)样品—样品溶液中，待测物A/内标物A；(Ai/As)对照—对照品溶液中，待测物A/内标物A。*六溴环十二烷（hexabromocylcododecane,HBCD）是一种用于建筑业，纺织业和电子产业的溴代阻燃剂HBCD有多个手性中心，六种立体异构体，但在化工产品中α，β，γ-HBCD.β环糊精手性柱氨基醇类药物：替考拉宁手性柱*5．检测系统（1）检测器(detector)的主要性能要求：灵敏度（sensitivity）高（检测限低）噪音（noise）低线性范围（linearrange）宽重复性（repeatability）好适用范围广（通用型、专属型）（2）主要分类紫外光度检测器：适用吸收紫外光的吸收荧光检测器：只能分析自身发光的物质，灵敏度高；示差折光检测器：利用折光率的差别*紫外检测器(ultraviolet-visibledetector，UVD)检测原理：基于被分析样品组分对特定波长紫外光的选择性吸收，组分浓度与吸光度的关系遵守朗伯－比尔(Lambert-Beer)定律。响应信号（吸光度）与浓度成正比A=㏑I0/I=εbcI0为入射光强度；I为透射光强度；ε摩尔吸光系数，b为检测器光程长度；c为组分摩尔浓度*应用使用范围广，有π键和孤对电子的物质，如烯烃、芳烃以及含有C=O、C=S、N=O、N=N基团的化合物。特点：灵敏度高；线形范围高；流通池可做的很小（1mm×10mm，容积8μL）；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。*荧光检测器（fluorescencedetector）在紫外光的激发下能发荧光的化合物或能用衍生法制成荧光衍生物的物质均可进行荧光检测。特点：高灵敏度比紫外检测器检测限高10-10g/ml高选择性；对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；激发波长(?ex)和发射波长(?em)的选择；如菲、芘和苯并a芘的激发波长：280、333和365nm；发射波长350、390和410nm*在食品研究中的分析应用食品中的天然成分碳水化合物类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇脂肪酸和有机酸蛋白、肽、氨基酸食品添加剂酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂抗氧化剂、防腐剂颜料和染料（色素〕维生素污染物霉菌（黄曲霉毒素〕农药和兽药残留多环芳烃（PAHs〕和亚硝酸11.6高效液相色谱的应用*在兽药研究中分析应用在医药研究中分析应用常用药物研究中的应用：解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等。甾体药物研究中的应用：肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。抗菌素类药物研究中的应用：青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等。中草药研究中的应用：生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类手性药物研究中的应用：光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉胺毒性小，L-异构体毒性很强)医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。 11.6高效液相色谱的应用*在生物化学和生物工程中的应用氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究（儿茶酚胺类)在精细化工分析中的应用醇、醛和酮、醚的分离分析酸和酯的分离分析表面活性剂的分析聚合物的分析研究药物、农药、染料、炸药等工业产品在无机离子分析中应用饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析11.6高效液相色谱的应用*化学结构极性和稳定程度水中和有机溶剂中溶解度相对分子质量的大小熟悉各种色谱类型主要特点