苦参碱可抑制Th17所诱导的角质形成细胞IL-17RA、IL-21R及IL-22R1的.pdfVIP

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苦参碱可抑制Th17所诱导的角质形成细胞IL-17RA、IL-

21R及IL-22R1的表达

周艳;牟宽厚;韩丹;李玥;侯卫坤;马亚梅;吕社民

【摘要】目的考察苦参碱(matrine,Mat)对Th17诱导的角质形成细胞

(keratinocytes,KC)系HaCaT细胞白细胞介素-17受体A(IL-17RA)、白细胞介素-

21受体(IL-21R)及白细胞介素-22受体1(IL-22R1)表达的影响.方法培养HaCaT

细胞,用Th17分泌的主要效应因子IL-17A(10ng/mL)、IL-21(10ng/mL)及IL-

22(10ng/mL)联合刺激HaCaT细胞模拟类银屑病样细胞模型,再用10tμg/mL

及100μg/mL的Mat干预此细胞模型,采用RT-qPCR及Westernblot方法检测

IL-17RA、IL-21R及IL-22R1的表达变化.结果IL-17RA、IL-21R及IL-22R1的

mRNA及蛋白在HaCaT细胞上有表达.IL-17A、IL-21及IL-22联合刺激可以显著

促进HaCaT细胞IL-17RA、IL-21RmRNA及蛋白表达,IL-22R1蛋白的表达量升

高(P<0.05).Mat单独干预或与上述细胞因子联合干预组与未处理的HaCaT细胞

组相比,IL-17RA、IL-21R及IL-22R1表达无显著下降(P>0.05),但可以显著降低

IL-17A、IL-21及IL-22联合刺激后所升高的受体蛋白表达(P<0.05).结论IL-17A、

IL-21及IL-22联合刺激角质形成细胞可以增强IL-17RA、IL-21R及IL-22R1的

表达,Mat可抑制这种增强作用,可能在多种Th17介导的免疫性皮肤病中发挥抗炎

作用.

【期刊名称】《西安交通大学学报(医学版)》

【年(卷),期】2014(035)005

【总页数】5页(P695-699)

【关键词】苦参碱;Th17细胞因子;白介素-17受体A;白介素-21受体;白介素-22

受体1

【作者】周艳;牟宽厚;韩丹;李玥;侯卫坤;马亚梅;吕社民

【作者单位】西安交通大学医学院第一附属医院皮肤科,陕西西安710061;西安交

通大学医学院第一附属医院皮肤科,陕西西安710061;西安交通大学医学院第一附

属医院皮肤科,陕西西安710061;西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系,陕西

西安710061;西安市红会医院关节外科,陕西西安710054;西安交通大学医学院第

一附属医院皮肤科,陕西西安710061;西安交通大学医学院遗传学与分子生物学系,

陕西西安710061

【正文语种】中文

【中图分类】R751

角质形成细胞(keratinocytes,KC)是许多皮肤病中参与炎症反应和皮肤免疫的重

要免疫细胞[1]。HaCaT细胞株具有与正常KC相似的分化特征,在体外容易培

养,可作为体外研究药物及皮肤病的良好模型[2]。近年来,Th17作为Th细胞

的新亚型,参与银屑病、接触性皮炎、特应性皮炎等许多皮肤病的免疫发病机制

[3]。Th17细胞主要产生IL-17A、IL-21和IL-22等,IL-17RA、IL-21R和IL-

22R1分别为IL-17A、IL-21和IL-22的主要受体[4-6]。Th17作用于皮肤需要

通过激活上述受体而发挥其作用。苦参碱(matrine,Mat)对多种自身免疫性疾病

具有抗炎作用[7],也可用于炎症性皮肤疾病的治疗,但其作用机制复杂,尤其

是其抑炎机制是否与Th17相关尚不清楚。因此,本实验从Mat对Th17所产生

因子的受体影响着手,选择其作用于皮肤的角质形成细胞作为研究靶点,以期为

Mat治疗银屑病等多种皮肤病提供理论依据。

1.1细胞及试剂人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)由第四军医大学皮肤科实验

室馈赠,本实验室保存。RPMI-1640细胞培养基(Hyclone,美国),胰蛋白酶及

EDTA(杭州四季青公司)。Trizol法总RNA抽提试剂盒(Invitrogen,美国);用于

RT-qPCR的IL-17RA、IL-21R及IL-22R1引物(北京奥克公司);SYBR®P

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