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CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制

严力;叶耿泰;沈智勇;朱显军;刘浩;李国新

【摘要】目的：检测胶原三股螺旋重叠蛋白（CTHRC1）在结直肠癌组织及细胞

中的表达，探讨CTHRC1对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。方法应

用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRC1在结直肠癌组织和5株结直肠癌细

胞的表达；将靶向作用于CTHRC1的shRNA和NC转染进LOVO细胞；CCK-8、

Transwell、平板克隆检测细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。Western

blotting检测转染后CTHRC1、ERK1/2、P-ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、

Vimentin、β-catenin表达的变化。结果与正常黏膜组织相比，20例癌组织中的

CTHRC1mRNA的平均表达量为0.0411±0.054，显著高于正常黏膜组织

P=0.016，蛋白水平的结果与之一致；同时，CTHRC1在SW620和LOVO细胞

里的表达（mRNA水平和蛋白水平）均显著高于HT29细胞株；较之对照组，

CTHRC1敲低组抑制了LOVO细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力，差异均

具有统计学意义P0.05。当CTHRC1在mRNA和蛋白水平的表达均被明显抑制

时，总ERK1/2在保持基本不变的的前提下，P-ERK1/2明显降低，EMT出现逆

转（即MET，E-cadherin升高，N-cadherin、Vimentin、β-catenin降低）。

结论CTHRC1在结直肠癌组织及高转移潜能的人结直肠癌细胞株SW620和

LOVO中高表达。敲低CTHRC1抑制了结直肠癌细胞株LOVO的增殖、迁移、侵

袭、克隆形成能力。CTHRC1通过增强ERK1/2的磷酸化所介导的EMT促进结直

肠癌的侵袭转移。%ObjectiveToexploretheexpressionofcollagentriple

helixrepeatcontaining1(CTHRC1)incolorectalcancerandstudyitsrole

inregulatingthebiologicalbehaviorsofcolorectalcancerLoVocellsin

vitro.MethodsReal-timePCRandWesternblottingwereusedtodetect

theexpressionsofCTHRC1incolorectalcancertissueandpairedadjacent

nontumoroustissueandin5colorectalcancercells.pGPU6-CTHRC1-

shRNAwastransfectedintoLoVocellsandthechangesincellproliferation

wasassessedusingcellcountingkit-8(CCK8)assay;thechangesincell

migrationandinvasionwereinvestigatedusingTranswellassay;plate

colonyformingtestwasusedtoevaluatetheadhesionandcolonyforming

activityofthecells.Westernblottingwasusedtoanalyzethechangesin

theexpressionsoftherelatedpathwaymarkers.ResultsTherelative

expressionofCTHRC1mRNAinthecancertissuespec