伴随基因突变-扩增在肺癌患者中的变化及其临床意义 .pdfVIP

伴随基因突变-扩增在肺癌患者中的变

化及其临床意义

潘雪，高春峰，邢玉斐，钟安媛，周童，张增利，施敏骅

苏州大学附属第二医院呼吸与危重症医学科，江苏苏州__

2021年美国癌症协会数据报告，肺癌仍是目前人类死亡率

最高（男性22%，女性22%）的肿瘤［1］。肺癌的恶性程度较高，

病情进展较快，超过70%的患者在确诊时已出现局部或远隔器官

的转移，失去了手术治疗的最佳时机［2］。表皮生长因子受体⁃

酪氨酸激酶抑制剂（epidermalgrowthfactorreceptor⁃tyrosine

kinaseinhibitor，EGFR⁃TKI）已成为表皮生长因子受体

（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）基因敏感突变患者

的一线标准治疗，建议初诊非小细胞肺癌患者完善新一代基因测

序（next⁃generationsequencingtechnology，NGS）检测［3］。

NGS检测除了可为患者选择合适的靶向治疗外，还可以预测疗

效，发现耐药机制，同时能发现新的基因突变类型，为靶向药物

研发提供依据［4］。本研究回顾性分析经NGS检测的71例肺癌

患者的基因检测数据，并进一步分析其临床意义。

1.1对象

纳入苏州大学附属第二医院2015年12月—2020年7月

入组的肺癌患者，依据气管镜、电子计算机断层扫描引导下经皮

肺穿刺、胸腔积液病理结果明确诊断。患者或家属均已签署书面

知情同意书，本研究已经苏州大学附属第二医院伦理委员会审批

［（2013）伦审科研第（K11）号］通过。

纳入标准：①组织学或细胞学确诊的肺癌患者；

②年龄≥18岁。排除标准：①同时有其他恶性肿瘤；

②存在可能影响随访和短期生存的其他严重疾病；

③既往服用过EGFR⁃TKI等靶向药物、免疫药物；

④既往接受过化疗、放疗或其他治疗。共纳入71例患者（132

份标本）。

1.2标本收集及患者随访

1.2.1检测标本

肿瘤组织来源为气管镜下活检组织标本、肺穿刺活检组织标

本，循环肿瘤DNA（circulatingtumordeoxyribonucleicacid，

ctDNA）检测标本为外周血液、胸腔积液、脑脊液。

1.2.2标本收集

血液、胸腔积液、脑脊液标本：收集患者用药前和耐药后全

血（8mL）或胸腔积液（8mL）或脑脊液（3mL），保存于streck

管，并于管壁标记患者姓名及样品号，15～35℃条件下运输，72

h内运送至实验室。4℃条件下，1590g离心10min，收集上清

至15mL离心管，4℃条件下16000g离心10min，再次收集上

清至新的15mL离心管。封口膜封口后干冰运输。

石蜡组织标本：收集患者肿瘤组织切片，要求恶性肿瘤细胞

占比≥10%，坏死组织区域≤50%，标本编号标记规范清晰，石蜡

组织标本切片厚度5μm（防脱玻片），切片时摊片即可，无需烤

片处理，取6周以内的石蜡切片，每组切片15张，常温或2～

8℃运输。

1.2.3检测方法

采用NGS检测技术、细胞周期蛋白E1（cyclinE1，CCNE1）

等，进行1000×高深度测序，以测量上述基因中出现的低频及超

低频的来自肿瘤的DNA突变、重排、拷贝数增加等。

1.2.4生存随访

通过门诊或电话随访，于2016年1月开始，每个月随访1

次，直至患者死亡或研究结束。随访截至2020年11月30日，

患者在随访截止时间仍未死亡，则按截尾数据处理。中位随访时

间28.5个月。随访率为95%，3例失访。总生存期（overallsurvival，

OS）定义为患者治疗开始至患者死亡或末次随访的时间，中位OS

定义为生存率为50%时所对应的生存时间。

1.3统计学方法

采用GraphPadPrism7.0统计软件进行统计分析。定性资料

采用例数和率描述；

符合正态分布的定量资料，采用均数±标准差（）表示；

非正态分布资料，采用中位数（四分位数）［M（P25，P