DB22T 2800-2017 玉米大斑病菌对杀菌剂抗药性评价技术规范.docxVIP

ICS65.020B05

备案号：59164-2018DB22吉林省地方标准

DB22/T2800—2017

玉米大斑病菌对杀菌剂抗药性评价技术规范

TechnicalspecificationforresistanceevaluationofExserohilumturcicumtofungicides

2017-12-11发布2018-04-01实施

吉林省质量技术监督局发布

I

DB22/T2800—2017

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。

本标准起草单位：吉林大学。

本标准主要起草人：张祥辉、王岩、潘洪玉、张艳华、刘金亮、杨正宇、司乃国、许矛。

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DB22/T2800—2017

玉米大斑病菌对杀菌剂抗药性评价技术规范

1范围

本标准规定了玉米大斑病菌对杀菌剂敏感性测定、敏感基线建立、抗药性评价和待测菌株抗性水平评估。

本标准适用于玉米大斑病菌对吡唑醚菌酯、咪鲜胺和嘧菌酯抗药性评价。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。2.1

玉米大斑病菌fungusofNortherncornleafblight凸脐蠕孢菌（Exserohilumturcicum）。

2.2

杀菌剂抗药性resistancetofungicide

对农药敏感的野生型植物病原物个体或群体，由于遗传变异而对药剂出现敏感性下降的现象。2.3

有效中浓度effectiveconcentration(EC50)抑制50%病菌菌丝生长或孢子萌发时的杀菌剂浓度。

2.4

菌丝生长抑制率inhibitoryrateofmyceliumgrowth杀菌剂对靶标生物菌落生长抑制效率。

3杀菌剂敏感性测定

3.1测定方法

3.1.1供试菌株

在未施用过吡唑醚菌酯、咪鲜胺和嘧菌酯类杀菌剂的地区，采集病样，通过单孢分离纯化获得至少

50株玉米大斑病菌株，保存在PDA培养基中，置于4℃冰箱，备用。

3.1.2供试药剂

3.1.2.1吡唑醚菌酯标准品（98.5%）、咪鲜胺标准品（98%）、啶菌恶唑标准品（95%），三种杀菌剂

标准品均用分析纯丙酮进行溶解。

3.1.2.2PDA培养基（见附录A）。3.1.2.3无菌水。

3.1.3杀菌剂药液配制

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将杀菌剂标准品用相应的溶剂溶解，并用无菌水稀释，加入到PDA培养基中，制成含有系列质量浓度的PDA培养基，培养基中溶剂含量应低于0.1%。

3.1.4生长速率法测定

将培养好的玉米大斑病菌，用直径为5mm灭菌打孔器打成菌饼，置于含有杀菌剂的PDA培养基平板中，每个培养皿中一个菌饼，另设不含药剂的PDA培养基与只含等量溶剂PDA培养基为对照，于25℃恒温培养箱中培养7d，重复3次。采用十字交叉法测量各处理的菌落直径。

3.2计算方法

按公式（1）、（2）计算药剂对菌丝的生长抑制率，采用最小二乘法建立毒力回归方程，计算相关系数和药剂的有效中浓度（EC50），按照附录B.1记录试验结果。

DD1D2......................................(1)

式中：

D——菌落增长直径D1——菌落直径

D2——菌饼直径

0I100...................................(2)

0

式中：

I——菌落生长抑制率

D0——空白对照菌落增长直径D1——药剂处理菌落增长直径

4敏感基线的建立

利用供试菌株的EC50值制作敏感性频率分布图，确定是否符合正态性分布。若符合正态分布，供试菌株的EC50平均值作为玉米大斑病对杀菌剂的敏感基线；若不符合正态分布，出现双峰情况，证明供试菌株中已出现抗性菌株，应剔除，重新建立敏感基线。

5抗药性评价

建立待测菌株对杀菌剂的抗药性判定标准。

3

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表1待测菌株抗药性水平判定标准

抗性菌株

抗性指数RF（供试菌株EC50值/敏感基线的EC50值）

抗性水平吡唑醚菌酯

吡唑醚菌酯

咪鲜胺

啶菌恶唑

敏感菌株

≤5

≤5

≤5

S

低抗菌株

5＜RF≤10

5＜RF≤10

5＜RF≤10

LR

中抗菌株

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