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植物细胞有丝分裂的制片与观察

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一、实验目的

1.掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术

2.观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形

态特征

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二、实验原理

1.植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝

分裂

2.在有丝分裂过程中，染色体发生规律性动

态变化

3.染色体可被碱性染料着色，便于观察

4.根据显微镜下观察到的染色体特点可识别

有丝分裂不同时期

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三、实验仪器和药品

1.仪器：显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、

烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、

镊子、滴管、刀片、玻璃皿

2.材料：大蒜

3.药品：诺卡氏固定液1mol/L的HCl作为解

离液、卡宝品红作为染色液

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定：

实验前3-4d，将大蒜掰成蒜瓣摆在铺

有四层纱布的托盘里放入温度为25℃，

一定湿度的培养箱中培养，每天换

水两次待根长到1~2cm将根剪下用吸

水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液

（乙醇:冰醋酸=3:1）固定4~24小时。

固定的作用：杀死细胞，固定细胞形态，

维持染色体的完整性，提

高染色效果

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

（1）解离

目的：

使组织中的细胞分离开

操作：

先用95%的酒精漂洗，在HCL中

60℃水浴5min左右

（c）解离时，细胞已死亡

（a）解离充分是实验成功的必备条件

注意：

（b）解离过度，细胞结构被破坏

解离液：

1mol/L的HCl

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

漂洗液：

清水（先置于清水中浸泡2min左右）

目的：

洗去解离液，便于染色

次数：

2-3次

注意：

若不漂洗

解离过度（HCl作用）

影响染色（HCl与碱性染料反应）

（1）解离

（2）漂洗

备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

（1）解离

（2）漂洗

（3）取材

部位：

根尖2-3mm

注意：

要去除根尖乳白色根冠

（根尖分生区）

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成熟区

伸长区

分生区

根冠

根尖的结构

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

（1）解离

（3）取材

（2）漂洗

（4）染色

操作：

用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者将根尖均

匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8分钟后，

盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻

压载玻片,随即用一次性筷子进行敲片。

目的：

使细胞分散开，有利于观察

注意：

染色时敲片的力度要适中

染色剂：

卡宝品红染液

时间：

6-8min

（使染色体（质）着色）

染色时间过长—细胞全被染色，

无法观察

染色时间过短—染色体颜色过浅，

影响观察

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

解离→漂洗→取材→染色

3.观察

（1）低倍镜观察：

找到分生区细胞

特点：

细胞呈矩形，排列紧密，有分裂细胞

（2）高倍镜观察：

在低倍镜的基础上换用高倍镜

（3）仔细观察：

先找中期，再找其余各时期，注意染色体特点

（4）移动观察：

慢慢移动装片，完整观察各个时期

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四、实验流程

1.大蒜根尖培养及固定

2.装片制作

解离→漂洗→取材→染色

3.观察

低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察

注意：

a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片，观察有丝分裂各个时期。

b.显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细胞分裂的动态变化。

c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多

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操作要点

1.解离：培养好的根尖先用95％的酒精漂洗再放入1mol

/L的HCl中60℃水浴5min左右

2.漂洗：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解离液2-3

次，最后置于盛有清水的培养皿中

3.取材：用刀片切取根尖2-3mm处的分生区，并切去乳白

色的根冠

4.染色：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片将根尖

均匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8min后，

盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载

玻片随即用一次性筷子进行敲片。

5.观察：首先在低倍镜进行观察,再到高倍镜下观察。

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五、实验结果对比图

间期

前期

中期

后期

末期

后期与末