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必修一第12讲捕获光能的色素和结构第二单元细胞代谢
目标要求实验:提取和分离叶绿体色素。
01绿叶中色素的提取和分离02捕获光能的色素和结构考点
绿叶中色素的提取和分离01
绿叶中色素的提取和分离白化苗由于不能形成叶绿素,无法进行光合作用,待种子中贮存的养分耗尽就会死亡。可见,叶片中的色素与光能的捕获有关。绿叶中有哪些色素呢?玉米(白化苗)玉米(正常苗)
绿叶中色素的提取和分离一、实验原理1.提取原理2.分离原理无水乙醇可以用体积分数95%的乙醇加入适量无水碳酸钠来替代。用提取色素(色素能溶解在有机溶剂中)。用分离色素。层析液绿叶中的色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;反之则慢。这样,绿叶中色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分开。纸层析法分离的方法:
绿叶中色素的提取和分离二、材料用具新鲜的绿叶(如菠菜的绿叶:色素含量高)、干燥的定性滤纸、研钵、无水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸钙等。三、方法步骤1.提取绿叶中的色素2.分离色素3.观察与记录(1)制备滤纸条(2)画滤液细线(3)分离绿叶中的色素
12①称取5g的绿叶,剪碎,放入研钵中。②放入少许二氧化硅和碳酸钙,再放入10mL无水乙醇,迅速、充分地研磨。SiO2CaCO3无水乙醇迅速充分作用作用作用作用作用防止乙醇挥发有助于研磨充分防止色素被破坏溶解、提取色素叶绿体能够被充分破坏,使得色素能充分被释放出来1.提取绿叶中的色素
34③将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤。④将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞严。用单层尼龙布过滤,过滤叶脉及二氧化硅等并且不吸附色素。盛放滤液的试管用橡胶塞塞紧,防止无水乙醇的挥发。1.提取绿叶中的色素
(1)制备滤纸条干燥的定性滤纸为什么要剪去两角?避免层析液在边缘扩散过快(边缘效应),使其同步到达细线1cm铅笔线剪去两角2.分离色素——纸层析法
(2)画滤液细线为了积累更多的色素使分离色素带更明显。用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线画一条细线(可将滤液倒入培养皿,再用盖玻片蘸取滤液,在横线处按压出均匀的细线)。★注意:细齐直,待滤液干后,再画一两次。2.分离色素——纸层析法
(3)分离色素防止色素溶解在层析液中为何要盖上培养皿?防止层析液挥发,因其易挥发且有毒。插滤纸条层析液培养皿将适量的层析液倒入烧杯中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)插入层析液(细线不能浸入)中,观察色素带及其颜色并记录。2.分离色素——纸层析法
0.5秒延迟符,无意义,可删除.叶绿素类胡萝卜素(含量约3/4)(含量约1/4)叶绿素a(蓝绿色)叶绿素b(黄绿色)胡萝卜素(橙黄色)叶黄素(黄色)色素含量(色素带宽度):叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素溶解度(扩散速度):胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a>叶绿素b距离最远:距离最近:叶黄素和胡萝卜素叶绿素a和叶绿素b胡黄ab向前走3.观察与记录
胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b色素种类色素含量色素带宽度溶解度扩散速度胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b最窄较窄最宽较宽最少较少最多较多最高较高较低最低最快较快较慢最慢色素的功能:吸收、传递、转化光能色素的颜色是由其反射的光所决定3.观察与记录
绿叶中色素的提取和分离四、实验分析(1)收集到的滤液绿色过浅的原因分析a.未加石英砂(二氧化硅),研磨不充分。b.使用放置数天的菠菜叶,滤液色素(叶绿素)太少。c.一次加入大量的无水乙醇提取浓度太低(正确做法:分次加入少量无水乙醇提取色素)。d.未加碳酸钙或加入过少,色素分子被破坏。绿叶中色素提取和分离实验异常现象分析
(4)滤纸条只呈现胡萝卜素、叶黄素色素带没经干燥处理,滤液线不能达到细、齐的要求,使色素扩散不一致造成的。a.忘记画滤液细线。b.滤液细线接触到层析液,且时间较长,色素全部溶解到层析液中。忘记加碳酸钙导致叶绿素被破坏或所用叶片为“黄叶”。(2)滤纸条色素带重叠(3)滤纸条看不到色素带绿叶中色素提取和分离实验异常现象分析
色素分离的改进——灯芯法圆形滤纸打孔色素提取液笔帽滤液细线棉线(灯芯)蘸取盖穿过中间孔盖层析液结果橙黄色黄色蓝绿色黄绿色避免了滤液细线触及层析液123465层析
1.(2023·江苏高考)下列关于“提取和分离叶绿体色素”实验叙述合理的是()A.用有机溶剂提取色素时,加入碳酸钙是为了防止类胡萝卜素被破坏B.若连续多次重复画滤液细线可累积更多的色素,但易出现色素带重叠C.该实验提取和分离色素的方法可用于测定绿叶中各种色素含量D.用红色苋菜叶进行实验可得到5条色素带,花
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