微生物的培养基.pptVIP

第三节微生物的培养基;一、培养基的概念;培养基应具有的条件：

1.含有满足微生物生长发育的水分、碳源、氮源、生长因子及基本的离子（磷、硫、钠、钙、镁、钾、铁）及各种微量元素。

2.具有适宜的酸碱度(PH)。

3.具有一定的缓冲能力及一定的氧化还原电位和合适的渗透压。

;一、配制培养基的原则

1.选择适宜的营养物质

根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。

如：自养、异养

①细菌--牛肉膏蛋白胨(普通肉汤)培养基；

②放线菌--高氏1号合成培养基；

③酵母菌--麦芽汁培养基，马铃薯蔗糖

④霉菌--查氏培养基，马铃薯蔗糖;;3.控制PH值

各类微生物生长的最适pH各不相同。

细菌：7～7.5

放线菌：7.8～8.0

酵母菌、霉菌：4.5～6.0

生长和代谢--改变培养基pH。

维持pH值的恒定方式：

在培养基里加PH缓冲剂(6.4～7.2)或不溶性的碳酸盐。;配制培养基的原则

1.选择适宜的营养物质

2.营养物质的浓度及配比合适

3.控制培养基的PH值

4.原料来源的选择

5.选择适宜的灭菌处理方法;二、培养基的种类及应用;（一）根据培养基成分

1.合成培养基

又称限定性培养基，指由化学成分的营养物质（已知营养物质的成分的化学性质和数量）配制而成的培养基。

优点:化学成分精确、重复性强。

缺点:配制过程复杂，微生物生长较慢，价格昂贵。

应用：实验室内，研究微生物营养、代谢、菌种选育、菌种鉴定、生物测定等定量要求较高的研究。

;2.天然培养基

又称复杂培养基，采用动植物组织或微生物细胞或其提取物和粗消化产物制成的。

营养物质来源于天然物质。

天然物质：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麦芽汁、玉米粉、马铃薯、牛奶和血清等。

蒸熟的马铃薯、豆芽汁、麦芽汁--霉菌、酵母菌

普通牛肉汤、酵母膏、牛肉膏、蛋白胨等--细菌。

优点：配制方便，营养丰富，价格低廉。

缺点：成分不稳定，营养成分难以控制，结果复重性差。

应用：生产上大规模培养菌种。

;3.半合成培养基

即有天然有机物，又有已知成分化学药品的培养基。

在天然培养基的基础上适当加入无机盐类或在合成培养基的基础上添加某些有机物。

如马铃薯蔗糖培养基。

马铃薯蔗糖培养基成分:

去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，水1000mL.

优点：有效地满足微生物对营养物质的要求，适合大多数微生物。

应用：生产上、实验室;（二）根据培养基的物理状态分

1.固体培养基

在液体培养基中加入凝固剂（1.5～2.0%的琼脂），使液体培养基凝固呈固体状态，或直接由天然的固体营养物质制成的培养基，如白酒、固体食醋生产。

用途：分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏等。

凝固剂：琼脂、明胶和硅胶三种。

凝固剂要求:

①不被微生物利用分解，生长温度范围为固体。

②凝固点温度不能太低。琼脂:96℃，45℃

③无毒，灭菌不会破坏。

④透明及粘着力强。

⑤配制方便；便宜。;2.半固体培养基

在液体培养基中加入少量凝固剂,使之呈柔软的糨糊状或直接将营养物质配制成半流体状态的培养基。

凝固剂加量：0.2%～0.7%的琼脂。

应用:观察细菌的运动特征(有无鞭毛)、培养微好氧细菌，检验噬菌体。

小曲白酒-边糖化边发酵、酱油-高盐稀醪发酵

;3.液体培养基

把各种营养物质都溶解于水中，混合制成的液体状态的培养基。

培养基中不加任何凝固剂。通过振荡和搅拌增加通气量。

特点：成分均匀，便于灭菌处理、运输和监测。

应用：微生物生理生化特性研究、大规模的工业生产（啤酒、葡萄酒、乳制品生产）。;（三）按照培养基的功能分

(1)基础培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。

用途:作为一些特殊培养基的基础成分。

细菌:牛肉膏蛋白胨培养基

霉菌:马铃薯葡萄糖琼脂培养基

酵母菌:麦芽汁琼脂培养基;(2)选择培养基

在培养基中加入某些化学药品以抑制不需要的微生物生长，而促进需要的微生物生长的培养基。

化学药品---抑菌剂和杀菌剂

常用染色剂（结晶紫、亮绿、孟加拉红）或抗生素（青霉素、链霉素）.

分离革兰氏阴性菌--加青霉素或结晶紫(抑制G+).

分离酵母菌和霉菌--加抗生素(青霉素、链霉素，抑制细菌和放线菌)。

用途:将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。

;培养基中加入某些化学药品抑制不需要