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浙江中西医结合杂志２００７年第１７卷第１１期ＺｈｅｊｉａｎｇＪＩＴＣＷＭ（Ｖｏ１．１７Ｎｏ．１１２００７６８１

实验研究・

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肝素酶在胃癌组织中表达的临床意义探讨

沈强陈岳明杭州市第一人民医院杭州３１０００６

摘要目的：探讨肝素酶表达在胃癌发生、发展中的作用。方法：用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ—

ＰＣＲ）和实时荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ—ＰＣＲ）测定４２例胃癌和２６例非癌组织中肝素酶的表达情

况。采用Ｘ２检验比较肝素酶的表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结果：胃癌中肝素酶呈阳性

表达２６例（６１．９％）；非癌组织中呈弱阳性表达１例（３．８％）。ＲＴ—ＰＣＲ和ＦＱ—ＰＣＲ的检测结果均

相同。胃癌ＴＮＭ分期中Ⅲ、Ⅳ期肝素酶ｍＲＮＡ表达阳性率明显高于Ｉ、Ⅱ期（Ｐ＜０．０５）；肝素酶表

达与浆膜浸润、淋巴结转移或远端转移呈相关性（Ｐ＜０．０５）。结论：肝素酶可能促进胃癌浸润和转

移，在胃癌的转移途径中，参与淋巴道转移而非血道转移。肝素酶可作为预测胃癌复发、转移的分

子标志物之一。

关键词胃癌肝素酶逆转录聚合酶链反应实时荧光定量聚合酶链反应

胃癌位居消化道肿瘤之首。肝素酶（ｈｅｐａｒａ—Ｕ／ＬＡＭＶ逆转录酶１，０ｌ，反应体系为２０１￣１；室温

ｎａｓｅ）是一类ｐ—Ｄ糖苷内切酶（ｅｎｄｏ—ｐ—Ｄ—ｇｌｕｃｕｒｏｎｉ—１０ｍｉｎ，３７ｑＣ孵浴３０ｍｉｎ，９５ｑＣ放置５ｍｉｎ，冰浴５ｍｉｎ。

ｄａｓｅ），它既可存在于正常组织，也表达于多种恶性肝素酶ＰＣＲ扩增引物用ｐｒｍｉｅｅｒｘｐｒｅｓｓ３．０设计，由

肿瘤细胞表面。以水解的方式降解组织屏障中的糖上海生物工程技术有限公司合成。序列为：正向，

蛋白成分硫酸乙酰肝素糖蛋白（ＨＳＰＧｓ），释放５’一ＴｒＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＴＣＡＡＣ一３’；反向，５’一

ＨＳＰＧｓ结合的生物活性分子，促进细胞的侵袭和转ＧＡＴＦＣＡＩＴＡＣＡＴＧＧＣＡＴＣＡＣＴＡＣ一３’，扩增产物长

移，诱导肿瘤血管生成，降低肿瘤患者的生存度为５８５ｂｐ。内对照Ｂ—ａｃｔｉｎ扩增引物为：正向，５’一

率ｌＪ。１本实验通过逆转录聚合酶链反应（ＲＴ．ＴｒＣＣＡＧＣＣＴｒＣＣＴｒＣＣＴＧＧ一３’；反向。５’一ＡＴｒＧＣＴＣ—

ＰＣＲ）和实时荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ—ＰＣＲ）检测ＣＴＣＣＴＧＡＧＣＧＣＡＡ一３’，扩增产物长度为２２４ｂｐ。取

胃癌组织肝素酶ｍＲＮＡ的表达，旨在研究肝素酶的逆转录产物８ｌ按以下体系进行ＰＣＲ扩增：４．５ｌ

表达与胃癌临床病理特征之间的关系。１０×ＰＣＲｂｕｆｆｅｒ，１．０１ｘｌｌＯｍＭｄＮＴＰ，正反向引物各

１材料与方法５０ｐｍｏｌ，５Ｕ／￣ｌＴａｑ酶１．０ｗｌ，反应体系为５０１ｘｌ；在

１．１标本来源４２份胃癌组织为杭州市第一人民ＰＥ９６００扩增仪（美国ＡＢＩ公司）上进行９４ｑＣ变性

医院４２例胃癌患者的外科手术标本，患者手术前均２ｍｉｎ，９４ｑＣ３０秒、５７ｑＣ４５秒、７２ｑＣ４５秒扩增４０个

未接受过化疗。２６份非癌组织中属胃正常组织１２循环，最后７２ｑＣ延伸５ｒａｉｎ。ＰＣＲ产物经２％琼脂糖

份，慢性胃炎黏膜组织５份，来自胃镜室；胃腺瘤组电泳，用凝胶成像系统（美国ＢＩＯＲＡＤ公司）分析结

织９份，来自本院普通外科手术标本。取样时间果。

２００３年８月～２００５年６月。组织离体