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可见分光光度计法测定新血宝中亚铁含量

药学院药物制剂（一）班李凤丽

一实验综述

摘要：据文献报道，目前国内外用于铁含量测定的方法主要有分光光度法、火焰原

子吸收法、原子光谱吸收法等等[1-7]。可见分光光度法以其设备简单、操作快捷、灵敏度高、

结果直观的优点深受欢迎。本实验我们采用分光光度法，用盐酸羟胺作还原剂，以邻二氮菲

为显色剂，用722型分光光度计测定铁的含量[6]。在pH=2-9的溶液中，亚铁离子与邻二氮

菲生成稳定的橘红色络合物。其最大吸收波长为506nm当铁以三价铁离子形式存在于溶液

中时因与邻二氮菲生成配合物而产生干扰，测定时可预先用还原剂（盐酸羟胺）将其还原为

亚铁离子。在实验中我们用可见分光光度法测定新血宝中铁的含量[6]，通过考察显色剂的

用量、最大吸收波长、盐酸羟胺的用量等实验因素对吸光度的影响，做正交实验，然后根据

实验结果选择后最佳显色条件和测量条件测定新血宝胶囊中铁的含量。

关键词：邻二氮菲，分光光度计法，新血宝，铁

二实验目的

1.掌握可见分光光度计的使用。

2.掌握分光光度法在药物含量测定中的应用。

3.熟悉对照品溶液的配制，供试品溶液的制备方法。

4.熟悉中外文献的查阅方法。

二、实验原理

可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。为

了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件。这些条件主

要包括入射光波长、显色剂用量、盐酸羟胺的用量等。

显色原理：

三、仪器及试剂

1.仪器：722E（或其他型号）分光光度计、容量瓶移液管、胶头滴管、吸耳球、、分析

天平。

2．试剂：铁标准溶液浓度：100ug/ml、10%新配制盐酸羟胺溶液（还原剂）0.15%邻

二氮菲溶液（显色剂）醋酸盐缓冲溶液

四试液的制备

1.样品溶液的配制：取新血宝胶囊内容物0.25g，精密称定，置于250ml容量瓶中，加

2.5ml硫酸和100ml，混匀，加水稀释至刻度线，摇匀。

2醋酸盐缓冲溶液的配制：取醋酸与钠136g与冰醋酸120mL于500mL容量瓶中，加蒸

馏水定容，摇匀。

五实验设计方案

各因素和水平如下

最大吸收波长察显色剂的用量盐酸羟胺的用量

水平

因素A(nm)B(mL)C(mL)

5020.50.5

1

25041.01.0

35061.51.5

45082.02.0

55102.52.5

在25mL的容量瓶中，准确加入0.5mL标铁溶液，5mL醋酸盐缓冲溶液，按下列水平列表

准确加入盐酸羟胺，显色剂，加蒸馏水定容，摇匀。

(5水平列表):

实验号实验结

列号1(A)2(B)3(C)456果（吸光

度A)

11(502)1(0.5)1(0.5)111

21(502)2(1.0)2(1.0)222

31(502)3(1.5)3(1.