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维生素E对毒死蜱胁迫下斑马鱼血清CAT

和SOD的保护作用

作者：焦铭，孙雪，李笔，等

来源：《湖北农业科学》2015年第7期

焦铭，孙雪，李笔，黄俊潮

（湖北科技学院基础医学院，湖北咸宁４３７１００）

摘要：通过对斑马鱼肌肉注射不同浓度毒死蜱以及维生素Ｅ，研究斑马鱼血清中过氧化氢

酶（ＣＡＴ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力变化情况以及维生素Ｅ的抗氧化作用。试验分

为５组，依次为对照组和低、中、高浓度毒死蜱组（０．００２、０．０２、０．２ｍｇ／ｋ

ｇ）以及高浓度联合维生素Ｅ（０．２ｍｇ／ｋｇ＋ＶＥ）治疗组。结果表明，毒死蜱不同浓

度组短时间（２４ｈ）作用均使两种酶活性升高（P﹤０．０１），加维生素Ｅ组活性增高更

显著；长时间（１６８ｈ）作用则明显抑制酶活性（P﹤０．０１），维生素Ｅ组酶活性变化

较平缓。表明毒死蜱对斑马鱼机体抗氧化系统损伤作用明显，维生素Ｅ对ＣＡＴ和ＳＯＤ活力

有保护作用。

关键词：维生素Ｅ；毒死蜱；斑马鱼；过氧化氢酶；超氧化物歧化酶

中图分类号：Ｘ５９２

文献标识码：A

文章编号：0439－８114（２０15）07－1590-03

DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.07.014

毒死蜱（Ｃｈｌｏｒｐｙｒｉｆｏｓ）商品名为乐斯本，具有触杀、胃毒和熏蒸作用，凭

借其高效、低毒、广谱的特性成为全球应用最为广泛的农药之一［１］。毒死蜱主要通过干扰

胆碱酯酶的活性，从而影响人类和昆虫的中枢神经系统［２］。毒死蜱类有机磷农药对哺乳动

物的毒性较低，但对水生鱼类的毒性却比较高，若使用不当进入水环境，将对水生生态和水产

养殖带来比较大的危害［３］。由于毒死蜱的大量使用，在较多地区的土壤、大气、雨水和地

下水等均能检测到毒死蜱残留，水体也由于毒死蜱污染累积导致鱼类死亡。农药对环境产生的

危害最终会通过富集浓缩和食物链传递给人类［４］。因此，研究毒死蜱的毒理作用将可为农

药安全使用，水产资源和生态环境保护提供理论依据。

外源毒物通过各种途径进入生物机体后，感染机体会出现各种生物标记物的改变，这种生

物标记物常用来评估受试化学品对生物的生态毒理效应［５］，过氧化氢酶（ＣＡＴ）和超氧

化物歧化酶（ＳＯＤ）是生物标记物中最典型的两种酶。ＣＡＴ和ＳＯＤ是体内清除自由基的

抗氧化酶，它们之间通过协同作用能够防止自由基对细胞结构的损伤［６］。环境污染物质对

水生生物会造成过氧化胁迫，使生物体内产生大量自由基［７］，ＳＯＤ能催化歧化体内超氧

阴离子自由基为过氧化氢（Ｈ２Ｏ２），ＣＡＴ催化Ｈ２Ｏ２分解为Ｈ２Ｏ和Ｏ２。通过ＣＡ

Ｔ和ＳＯＤ调节体内的氧自由基处于平衡的状态，一旦机体受到毒理损伤，这种平衡就会被打

破，因而ＣＡＴ和ＳＯＤ作为抗氧化防御系统的改变就能反映环境对机体的毒害作用。本试验

研究了毒死蜱对斑马鱼血清中ＣＡＴ和ＳＯＤ的影响，以衡量农药对水产环境及水生生物的生

态毒理指标。

维生素Ｅ有许多生理功能，其中最重要的功能就是抗氧化。维生素Ｅ能有效防止机体脂质

过氧化及由于外因所致的氧化，保护细胞骨架、蛋白质巯基，维持细胞膜的正常功能，尤其是

保护亚细胞膜的完整性，避免受到过氧化物损害［８］。另外维生素Ｅ还能防治由氧化应激导

致的心血管疾病、动脉粥样硬化和癌症等［９］。本研究表明维生素Ｅ能够有效保护ＣＡＴ和

ＳＯＤ在斑马鱼血清中的活性，减轻毒死蜱对机体造成的过氧化胁迫。

１材料与方法

１．１材料

斑马鱼由中国科学院水生生物研究所提供，平均体长２～３ｃｍ。试验前在室内驯养７

ｄ以上，自然死亡率小于２％，试验前１天停止喂食，试验期间每４８ｈ定量喂食１次。

１．２试剂与仪器

毒死蜱原药（９８％，安徽华星化工股份有限公司），用无菌生理盐水配成不同浓度溶液

待用。其他试剂均为国产分析纯。仪器为ＵＶ－２５５０型紫外－可见分光光度计（岛津制作

所）。

１．３方法

１．３．１试验设计和染毒试验共分５组，分别为阴性对照组、低中高３个浓度梯度

试验组和１个高浓度联合维生素Ｅ组。根据急性毒性试验结果，以０．００２、０．０２、

０．２ｍｇ／ｋｇ剂量对斑马鱼进行肌肉注射，每组２５尾鱼，每尾注射１ｍＬ毒死蜱溶液，

分别于容积１０Ｌ塑料箱中装水饲养。维生素Ｅ剂量为１００ｍｇ／ｋｇ，稀释液现配现用，

使用时在旋涡