糖和苷类化合物 (5).ppt

六、苷键构型的决定⑴分子旋光差（klyne法）⑵酶催化水解方法：酶水解具有高的专属性。可以选择性地催化水解某一构型的苷。如：麦芽糖酶－水解α-D-葡萄糖苷键纤维素酶－水解β-D-葡萄糖苷键⑶核磁共振波谱法：氢核磁共振波谱（1H－NMR）碳核磁共振波谱（13C－NMR）第60页,共80页，5月，星期六，2024年，5月 一、糖链结构的测定主要解决的问题：1．单糖的组成2．单糖之间连接位置的决定3．糖链连接顺序的决定4．苷键构型的决定第61页,共80页，5月，星期六，2024年，5月1．单糖的组成低聚糖、多糖的结构分析，首先要了解由哪些单糖所组成，各种单糖之间的比例如何。一般是将苷键全水解，用PC检出单糖的种类，经显色后用薄层扫描仪求得各种糖的分子比。也可用TLC或HPLC对单糖定性定量。第62页,共80页，5月，星期六，2024年，5月2．单糖之间连接位置的决定1）部分水解法：将糖链全甲基化→水解→甲基化单糖的定性和定量（气相层析）可以获知被测物中含有的糖的类型、甲基化的位置及相互之间的分子比等。（1）甲基化单糖中游离-OH的部位就是连接位置（2）全甲基化的单糖即是末端糖。2）13C-NMR测定：主要归属各碳信号，以确定产生苷化位移的碳。第63页,共80页，5月，星期六，2024年，5月3．糖链连接顺序的决定1）缓和水解法：将糖链水解成较小的片段，然后分析这些低聚糖的连接顺序。2）质谱分析：在了解糖的组成后，根据质谱中的裂解规律和该化合物的裂解碎片推测低聚糖及其苷中糖链的连接顺序。第64页,共80页，5月，星期六，2024年，5月4．苷键构型的决定⑴分子旋光差（klyne法）⑵酶催化水解方法：酶水解具有高的专属性。可以选择性地催化水解某一构型的苷。如：麦芽糖酶－水解α-D-葡萄糖苷键纤维素酶－水解β-D-葡萄糖苷键⑶核磁共振波谱法：氢核磁共振波谱（1H－NMR）碳核磁共振波谱（13C－NMR）第65页,共80页，5月，星期六，2024年，5月1）1H-NMR判断糖苷键的相对构型①糖的1H-NMR性质化学位移规律：端基质子：4.3～6.0ppm特点：比较容易辨认用途：1确定糖基的个数2确定糖基的种类32D-NMR谱上糖信号的归属4糖的位置的判断第66页,共80页，5月，星期六，2024年，5月糖上其余质子信号：3.2～4.2ppm特点:信号集中,难以解析归属:往往需借助2D-NMR技术.甲基质子：～1.0ppm特点：比较容易辨认用途：1确定甲基五碳糖的个数2确定甲基五碳糖的种类3确定甲基五碳糖的位置42D-NMR谱上甲基五碳糖信号的归属第67页,共80页，5月，星期六，2024年，5月偶合常数：与二面角有关二面角90度J＝0Hz；二面角0或180度J＝8Hz；二面角60度J＝4Hz第68页,共80页，5月，星期六，2024年，5月对于糖质子：当2-H为直立键时，1位苷键的取向不同，1-H与2-H的两面角不同，偶合常数亦不同：β-D-和α-L-型糖：1-H和2-H键为双直立键，φ=180°，J＝6～8Hzα-D-和-L-型糖：1-H为平伏键，2-H双直立键，φ＝60°，J＝2～4Hz第69页,共80页，5月，星期六，2024年，5月可通过C1-H与C2-H的偶合常数，来判断苷键的构型（α、β）β－苷JH1－H2＝6～8Hzα－苷JH1－H2＝2～4Hz第70页,共80页，5月，星期六，2024年，5月第71页,共80页，5月，星期六，2024年，5月甲基化反应（--OH--OCH3）方法试剂溶剂特点Haworth法硫酸二甲酯浓NaOH全甲基化需反复进行Purdie法CH3I+Ag2OTHF不能用于还原糖的甲基化Kuhn法CH3I+Ag2ODMF反应较慢Hakomori法CH3I+NaHDMSO最常用的全甲基化方法（箱守法）第72页,共80页，5