高三生物一轮复习课件重组DNA技术的基本工具 .pptx

课程名称：重组DNA技术的基本工具

学科：生物学

年级：高三（上学期）

单元主题：基因工程

重组DNA技术的基本工具

提取DNA如何将Bt基因从DNA分子中切割下来呢？专门的“分子工具”Bt基因

学习目标1.运用结构与功能观说明基因工程的各种工具及各自的作用，说出载体所具备的条件。2.通过模拟活动，能构建出正确的基因表达载体，发展科学思维和科学探究能力；并在过程中体会技术的创新性、精巧性和实用性。

任务1：自主阅读教材P71“限制性内切核酸酶-分子手术刀”相关内容，明确限制酶的来源、作用及作用结果。环节一认识分子手术刀---限制酶

环节一认识分子手术刀---限制酶【小组活动】仔细观察黄色和紫色的DNA序列，结合教材中给出的EcoRI、SmaI的相关信息，模拟它们的切割，并获取Bt基因。

环节一认识分子手术刀---限制酶1.两种限制酶识别的DNA序列的两条链的碱基序列有什么特点？2.EcoRI、SmaI切割后形成的末端类型是否相同？3.同种限制酶切出的黏性末端之间有什么特点？3.序列相同且碱基能互补配对。1.两条链的碱基排列顺序（从5’→3’读）是相同的。2.不相同；黏性末端(从识别序列中轴线两侧切开)平末端(从识别序列中轴线处切开）不能；直接导入会导致Bt基因不能稳定存在并表达获得的Bt基因可以直接导入棉花细胞中吗？观察你的序列，尝试回答以下问题：

任务2：阅读课本P72相关内容，思考以下问题：1.载体作用、种类2.什么是质粒？3.载体要与Bt基因连接需要具备什么条件？4.要使Bt基因在棉花细胞中大量复制，载体需要具备什么条件？5.为了便于筛选重组DNA分子，载体需要具备什么条件？环节二认识分子运输车---载体有一个至多个限制酶切割位点能整合到棉花细胞DNA上同步复制有特殊的标记基因①将目的基因送入受体细胞，使其稳定存在并表达。环状双链DNA分子②质粒、噬菌体、动植物病毒等

任务3：模型构建请以小组为单位，用粉色的环状DNA模拟载有Bt基因的分子运输车（即Bt基因表达载体）。环节二认识分子运输车---载体正向连接VS反向连接×√

任务4：模型修正请继续以小组为单位，对Bt基因和质粒的切割进行修正，从而构建出正确的基因表达载体环节二认识分子运输车---载体双酶切：避免目的基因和质粒的自身环化以及目的基因的反向连接。①提示：PstⅠ的识别序列5-CTGCAG-3,并在A与G之间切割。②提示：长的质粒片段上有标记基因和复制原点等。

1.订书器代表什么？2.订书针代表什么？任务5：模型完善请同学们阅读P72“DNA连接酶-分子缝合针”相关内容，选择合适的工具使Bt基因表达载体变得稳定。环节三认识分子缝合针---DNA连接酶DNA连接酶磷酸二酯键不稳定。被限制酶切开的磷酸二酯键处于断开状态。你构建的Bt基因表达载体是否稳定？说明原因。

任务6：结合课本内容完成以下表格：环节三认识分子缝合针---DNA连接酶类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源________________________功能只缝合__________缝合____________和____________结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的_________________大肠杆菌T4噬菌体互补的黏性末端互补的黏性末端平末端(效率较低)磷酸二酯键刚才使用的订书器代表哪种DNA连接酶？两种DNA连接酶均可。

归纳总结：Bt基因表达载体的构建过程

模拟真实情境下的基因表达载体的构建过程。

SpeⅠ_______HindⅢ_________XbaⅠ_______XhoⅠ_______2.哪种限制酶切割产生的片段能与SpeⅠ切割产生的片段相连接？为什么？3.不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端，这在基因工程操作中有什么意义？AGCTCTAGCTAGTCGA1.哪几种限制酶切割可以形成黏性末端？请写出对应的黏性末端（注意：从5’往3’读）切割位点的选择范围扩大XbaⅠ两者切割产生了相同的黏性末端巩固练习

1.自我检测学习目标是否达成？1.运用结构与功能观说明基因工程的各种工具及各自的作用，说出载体所具备的条件。2.通过模拟活动，能构建出正确的基因表达载体，发展科学思维和科学探究能力；过程中体会技术的创新性、精巧性和实用性。2.利用剩余时间构建本节课的思维导图

1.你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗？2.想一想，为什么限制酶不切割细菌（原核生物）本身的DNA分子？课后作业

制作单位：济南市莱芜第一中学

录制时间：2024.09