DB22T 2560-2016 水貂病毒性肠炎检疫技术规范　.pdfVIP

ICS11.220

B41

备案号：54237-2017DB22

吉林省地方标准

DB22/T2560—2016

水貂病毒性肠炎检疫技术规范

Quarantineprotocolforminkviralenteritis

2016-12-09发布2017-03-01实施

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T25602016

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前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。

本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口于吉林省畜牧业管理局。

本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心，中国农业科学院特产研究所。

本标准主要起草人：王伟利、王建科、孟庆峰、程悦宁、易立、姚贵哲、王准、宋翱、程世鹏。

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水貂病毒性肠炎检疫技术规范

1范围

本标准规定了水貂病毒性肠炎的病原分离鉴定、HA-HI试验、PCR、Real-timePCR及动物回归试验

等诊断技术要求。

本标准适用于水貂病毒性肠炎的检疫、疫情监测和流行病学调查。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析试验室用水规格和试验方法

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

MEV：水貂肠炎病毒

F81：猫肾传代细胞

CPE：细胞病变

Real-timePCR：实时荧光定量PCR

PBS：磷酸盐缓冲液

HA：血凝试验

HI：血凝抑制试验

4材料与试剂

4.1材料

——注射器（5mL、20mL）

——吸管（5mL、10mL）

——离心管（1.5mL、0.2mL）

——吸头

——96孔微量血凝板

——细胞培养瓶

——PCR管

——试验动物：3月龄健康水貂（水貂肠炎病毒HI抗体效价≤1∶4）

4.2试剂

——DEPC双蒸水（双蒸馏水1000mL、DEPC1mL，室温放置28h以上，0.105MPa蒸汽高压30min。

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4℃或室温保存）

——培养液（DMEM粉10g、碳酸氢钠3.7g，溶于1000mL双蒸水中，抽滤分装，4℃保存）

——营养液（DMEM培养液900mL、犊牛血清100mL，加青霉素、链霉素，使其浓度分别达到200IU/mL、

200µg/mL抽滤除菌）

——维持液（DMEM培养液980mL、犊牛血清20mL，加青霉素、链霉素使其终浓度分别达200IU/mL、