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ICS11.220
B41
备案号:56329-2017DB22
吉林省地方标准
DB22/T2628—2017
鹅细小病毒检测聚合酶链式反应(PCR)法
Detectionmethodofpolymerasechainreactionforgooseparvovirus
2017–06-12发布2017-08-12实施
吉林省质量技术监督局发布
DB22/T2628—2017
前言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。
本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。
本标准起草单位:吉林省畜牧兽医科学研究院、吉林省动物疾病预防控制中心、吉林省畜牧总站、
吉林省牧业信息中心、梅河口市畜牧总站、榆树市动物卫生监督所。
本标准主要起草人:邵洪泽、黄海楠、孙亮、董航、李昱洁、王楠、郭衍冰、毛文智、呼延含蓉、
卢松岩、张涛、李桂华、陆秀娟。
I
DB22/T2628—2017
鹅细小病毒检测聚合酶链式反应(PCR)法
警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验,本标准并未指出所有可能的安全问
题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件。
1范围
本标准规定了鹅细小病毒检测方法的操作步骤和结果判定。
本标准适用于鹅细小病毒的检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB19489实验室生物安全通用要求
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫
3生物安全措施
为了保护实验室人员的安全,应由具备资格的工作人员检测,所有培养物和废弃物应按照GB19489
中的有关规定执行。
4防污染措施
防止污染措施应符合GB/T27401的规定。
实验室应根据实验要求分为相对独立的工作区域,避免不同工作区域内的设备、物品混用;每一个
区域须有专用的仪器设备。
5试剂
除有特殊说明外,所有实验用试剂均为分析纯;实验用水符合GB/T6682中一级水的要求。
5.1PCR反应试剂如下:
——10×PCR扩增缓冲液,见附录A中A.1;
——2U/μLTaqDNA聚合酶;
——10mmol/LdNTPs;
——灭菌ddH2O。
5.2DNA提取试剂盒或DNA抽提试剂如下:
1
DB22/T2628—2017
——TE缓冲液(10mmol/LTris-HCl,pH8.0,1mmol/LEDTA,pH8.0),见附录A中A.2;
——酚-氯仿-异戊醇(25/24/1V/V);
——异丙醇;
——70%乙醇。
5.3其他试剂
——生理盐水;
——1倍TAE电泳缓冲液,见附录A中A.3;
——凝胶加样缓冲液,见附录A中A.4;
——10mg/mL溴化乙锭(EB),见附录
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