DB22T 2630-2017 羊传染性脓疱病毒检测 环介导等温扩增(LAMP)法.pdfVIP

ICS11.220

B41

备案号：56331-2017DB22

吉林省地方标准

DB22/T2630—2017

羊传染性脓疱病毒检测环介导等温扩增

（LAMP）法

ThedetectionofOrfvirusbyLoop-MediatedIsothermalAmplification（LAMP）

method

2017-06-12发布2017-08-12实施

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T2630—2017

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。

本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。

本标准起草单位：吉林省畜牧兽医科学研究院，吉林省动物疫病预防控制中心。

本标准主要起草人：程荣华、邵洪泽、呼延含蓉、柴方红、卢松岩、王楠、李文东、毛文智、刘沂

霖、赵欣、石春军、陆伟、何浩、孙健。

I

DB22/T2630—2017

羊传染性脓疱病毒检测环介导等温扩增（LAMP）法

警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验，本标准并未指出所有可能的安全问

题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

1范围

本标准规定了羊传染性脓疱病毒环介导等温扩增检测方法的操作步骤、结果判定。

本标准适用于羊传染性脓疱病毒的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3试剂材料

3.1试剂

3.1.1DNA提取试剂盒

3.1.2LAMP试剂

——10×BstDNA聚合酶缓冲液（200mmol/LTris-HCl，100mmol/LKCl，100mmol/L(NH4)2SO4，

20mmol/LMgSO4，1%Triton-100，pH8.8，25℃);

——25mmol/LMgCl2；

——10mmol/LdNTPs混合物：包括dATP、dTTP、dCTP、dGTP；

——8U/μLBstDNA聚合酶；

——5mol/LBetaine；

——ddH2O。

3.1.3其他试剂

——SYBRGreenI染料。

3.2特异性引物

引物序列，见表1（引物浓度）。

1

DB22/T2630—2017

表1特异性引物序列

引物种类引物名称核苷酸序列

F35-GACCCCGAGCTCATGGT-3

外引物

B35-GCCGCGTCTTCACCTGTA-3

FIP