基因扩增实验室区域划分、分子生物学实验室常用设备及计量要、核酸检测中涉及PCR污染的预防和处理原则、实验室管理要求.pdfVIP

GB/T27403—XXXX

附录A

（资料性）

基因扩增实验室区域划分

A.1总体要求

A.1.1实验室应设置单独的工作区域（房间和/或工作站），以减少潜在的对样本的污染和对人员的

危害，各工作区域之间应实现物理隔离，相对独立，不能有空气的直接相通。适用时，各分隔的工作区

域设置缓冲间。

注：工作区域指特定的房间，专用于一个或多个分析阶段的封闭房间；或工作站：用于某一分析阶

段的工作台或紫外线柜上的物理分隔区域，可能是房间的一部分。

A.1.2各工作区域应有明显的标记。

A.1.3各工作区域均应配备专用设备、器具和耗材，包括加样设备。适当时，可以用颜色或其他方

式对不同区域内的用品，包括工作服，加以区分，避免不同工作区域内的设备、用品混用。

A.1.4实验室可根据检测方法及使用仪器的功能，区域可适当合并。例如使用实时荧光PCR仪，扩

增区、扩增产物分析区可合并；采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则样品制

备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。

A.1.5实验室应避免在试剂配制和贮存区、预混液配置区采用负压气流，在样品制备区、核酸扩增

区和扩增产物分析区采用正压气流。

A.2实验室工作区域的设置及要求

A.2.1试剂配制和贮存区

用于试剂的制备、分装和贮存（包括商品化的试剂），及实验耗材，如离心管、吸头等的贮存和准

备。

注意：

1、试剂和耗材等材料应当直接运送至该区域，不能经过扩增区。

2、试剂经验收合格后，可根据需要将其分装贮存备用，贮存试剂的分装体积可根据实验室内一次

测定所需的扩增反应数决定。

3、用于扩增的试剂应低温贮存。试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区域，可以根据

类别保存在核酸扩增区或样品制备区。

A.2.2预混液配置区

用于预混液（包括引物、探针、dNTPs等）的配置、分装等。

注意：本区域可由符合要求的工作站替代，适宜时，也可放在试剂配制和贮存区内。

A.2.3样品制备区

用于待检样品制备，核酸（RNA、DNA）的提取、纯化、质量检查、贮存及其加入至预混液内，

各种标准物质或质控品的制备等。进行RNA检测的实验室，在此区域应有专门的RNA操作区。

注意：

1、粉碎样品的器血应单独使用，所用的器具在使用前应经过彻底清洗并采取高压等适当的消毒方

式，防止交叉污染。

2、已纯化的核酸应保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融，阳性和阴性标准物质核酸可调整至常用

的使用浓度后分装并冷冻保存。

3、在制备具有高浓度细胞和/或核酸材料（如阳性对照等）时，宜与样品制备分开不同时间制备，

且宜在工作区内的不同分区处理这些材料。

19

GB/T27403—XXXX

4、为避免样本间的交叉污染，加入待测核酸后，必须盖好含反应混合液的反应管。

5、对具有潜在传染危险性的材料，应符合生物安全实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求，

且必须在生物安全柜内开盖，并有明确的样品处理和灭活程序。

A.2.4核酸扩增区：

用于核酸扩增、检测和序列确认等。

注意：该区域被视为存在扩增产物污染可能。在该工作区内，装有扩增反应产物的反应管应保持密

闭；应尽量减少在本区内的走动，严格限制无关人员出人；加样应在超净工作台或生物安全柜内进行，

超净工作台的气流方向宜选择垂流式；巢式PCR的第二次加样必须在此区进行。

A.2.5．扩增产物分析区

用于扩增产物的检测和各种处理，如电泳和图像捕获、杂交、酶切、测序、质谱分析等。

注意：

1、如果不要求操作扩增产物，例如实时PCR，则不需要该工作区。

2、该区域被认为会受到扩增产物的高度污染。应避免通过本区的物品及