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检测A群猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条的制备的开题

报告

一、研究背景

群猪轮状病毒是一种重要的猪病毒，引起了猪场的经济损失和动物福利的问题。

因此，快速检测群猪轮状病毒的方法对于疫情监测和其它预防控制措施也具有重要意

义。研究中采用了胶体金免疫层析试纸条，这种试纸条具有使用简单、结果快速和成

本低廉的优点。

二、研究目的

本研究的主要目的是制备一种可用于检测A群猪轮状病毒的胶体金免疫层析试纸

条。具体包括：制备和选定A群猪轮状病毒特异性单克隆抗体、建立胶体金抗体标记

技术、制备群猪轮状病毒检测试纸条、测试其灵敏度和特异性等。

三、研究内容

（一）单克隆抗体的制备

1.制备抗原：采用基因重组技术构建A群猪轮状病毒的VP6基因表达载体，并

在大肠杆菌表达和纯化。

2.单克隆抗体的制备：抗原用于BALB/c小鼠的免疫和脾细胞融合技术制备特异

性的单克隆抗体。

（二）抗体标记的建立

1.胶体金标记抗体：选定特异性的单克隆抗体，采用共价结合的方法将其标记到

胶体金颗粒表面。

2.试纸条的制备：采用高分子材料将检测线和负对照线固定在胶体金免疫层析试

纸条上，并使用防水剂封闭试纸条的表面。

（三）试纸条的测试

1.灵敏度测试：采用A群猪轮状病毒不同浓度的溶液和低浓度的猪肠道病毒等

常见病毒株进行测试，比较试纸条对其灵敏度的影响。

2.特异性测试：使用A群猪轮状病毒及其它猪病毒株进行测试，比较试纸条对

不同病毒株的特异性。

3.临床应用测试：使用采集自猪场的样本对试纸条进行测试，验证其在实际应用

中的效果。

四、研究意义

本研究可以为猪场动物疫情监测提供一种快速、敏感、特异性高、操作简单、成

本低廉的检测方法。同时，该方法的应用也将有助于猪场管理和动物福利的提高。