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猪脑心肌炎病毒基因组分子特征及其全长感染性
cDNA克隆的构建的开题报告
猪脑心肌炎病毒(Porcineteschovirus,PTV)是一种RNA病毒,属
于柿状病毒科(Picornaviridae)特斯卡(Tescherivirus)属。该病毒可引
起猪的中枢神经系统疾病,其临床症状为烦躁、不适、厌食、发热、倒
地、四肢抽搐、瘫痪等。目前已知的PTV血清型有17个,但只有血清型
1、2、6、7和10与猪发生临床病例,其中血清型1和2为主要血清型。
因此,深入研究PTV基因组结构及其功能对于制定病毒防控策略和疫苗
研发具有重要意义。
本研究旨在构建猪脑心肌炎病毒血清型1全长感染性cDNA,并通过
对其基因组结构、编码蛋白及其功能的研究,探讨其分子特征。具体研
究内容如下:
1.PTV血清型1基因组结构的分析:通过对已有的PTV基因组序列
进行测序、拼接和组装,得到完整的PTV血清型1基因组数据,并进行
基因组结构分析、编码区预测等工作。
2.PTV血清型1编码蛋白的分析:通过对PTV血清型1基因组中的
编码区进行分析,预测PTV血清型1的编码蛋白,包括不同血清型的差
异分析。
3.PTV血清型1感染性cDNA的构建:采用RT-PCR技术,从感染
PTV血清型1的猪脑组织中提取RNA,经过逆转录、PCR扩增,构建全
长的PTV血清型1感染性cDNA。
4.PTV血清型1感染性cDNA的功能验证:通过将构建好的感染性
cDNA转染到细胞中,观察病毒复制、表达和感染细胞的情况,验证感染
性cDNA的功能。
本研究将首次建立PTV血清型1全长感染性cDNA,为进一步研究
PTV的结构和功能提供了重要的基础,并对猪脑心肌炎的防治提供了一
定的理论依据。
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