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文件名称微生物标准染色方法版本

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【检验目的】检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。

【原理】结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易

着色，但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予

染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初

色素的颜色（红色）。

【试剂】试剂名称：结核菌染色液

试剂生产厂家：珠海贝索生物技术有限公司

包装规格：250ml*4

试剂组成：1、石碳酸复红溶液

2、酸性酒精溶液

3、亚甲基蓝溶液

储存条件及有效期：原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染

色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

【标本要求】（1）标本类型：病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分

泌物、尿液等。

（2）标本采集：见标本采集手册（一般须得深咳痰，其它无特殊要求。）

（3）标本储存和运输：可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污

染环境。

【检验方法】1、痰液标本取干酪样、脓样或可疑部分约0.05毫升，其他体液标本取离心后

沉淀0.05毫升，于玻片正面均匀涂抹成10*20毫米卵圆形菌膜，自然干燥。染色前加热固

定。

2、放置在染色架上，玻片间距保持10毫米以上距离；火焰固定。

3、滴加石碳酸复红溶液盖满玻片，染色10分钟或更久。

4、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水。

5、自菌膜上端外缘滴加酸性酒精溶液盖满玻片，脱色1-2分钟；如有必要，

需流水洗去酸性酒精溶液后，再次脱色至菌膜无可视红色为止。

6、流水自玻片一端轻缓冲洗10-20秒，冲去酸性酒精溶液，沥去玻片上剩余

的水。

7、滴加亚甲基蓝溶液，染色30秒钟。

8、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去亚甲基蓝溶液，然后沥去标本上剩余的水，

待玻片干燥后镜检。

9、一张染色合格的玻片，菌膜肉眼观察为亮蓝色，无红色斑块。

【检验结果的解释】在淡蓝色背景下，抗酸性菌呈红色，其他细菌及细胞呈蓝色。结核分枝

杆菌多数为杆状、稍弯曲；菌体宽度0.3-0.6微米；菌体长度不一，在0.5-8微米之间，多

数在1.5-3.5微米；少数菌体较长者可呈螺旋状；染色良好的结核分枝杆菌菌体内，能够发

现着色较深的易染颗粒。含结核分枝杆菌较多的新鲜标本经染色油镜观察，既能发现单个存

在的细菌，也能看到聚集成簇或分枝状排列的细菌。

【结果报告】

镜下抗酸杆菌计数分级报告标准

连续300个视野未见抗酸杆菌抗酸杆菌阴性（-）

1-8条/300视野报告抗酸杆菌数

3-9条/100视野报告抗酸杆菌（1+）

1-9条/10视野报告抗酸杆菌（2+）

1-9条/每视野报告抗酸杆菌（3+）

≥10/

条