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甘露消毒丹及其挥发油对流感病毒感染小鼠肺部炎症相关因子的影
响
目的:觀察甘露消毒丹(GanluXiaoduMircropill,GXM)及其挥发油对流
感病毒(influenzavirus,IV)感染小鼠肺组织病理炎症、血清IL-6、TNF-α含量
及肺组织NS1、NF-κB表达的影响,探讨其抗IV感染的机制。方法:SPF级BALB/c
小鼠108只,随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、GXM灌胃组(C组)、
GXM滴鼻组(D组)、GXM合用组(E组)、奥司他韦组(F组),除A组外,
其余5组以IVFM1-6-E2滴鼻造模。于造模后第3、7、10天进行取材,对小鼠
肺组织病理炎症程度进行评分,并计算肺指数及干湿比,在电镜下观察肺组织超
微结构,采用ELISA法检测血清中IL-6、TNF-α的含量,采用qPCR方法检测
肺组织中NS1的基因表达,采用WesternBlot法检测肺组织NF-κB的表达。结
果:IV感染后,小鼠肺组织出现炎症改变,其肺组织病理评分、肺指数均升高,
干湿比降低,第7天炎症最为严重。电镜下可见肺泡上皮细胞肿胀,纤毛减少、
脱落,细胞器减少。血清IL-6、TNF-α含量均升高,肺组织NF-κB表达升高,
于第3天达峰值,而后降低;NS1表达亦升高,之后逐步下降。与B组比较,
各治疗组均能够减轻肺部炎症,降低病理评分、肺指数,升高干湿比,降低TNF-α
含量,下调NF-κB表达,其中尤以E、F组作用最为明显(P<0.05)。治疗第3
天,与B组比较,D、E、F组均能下调NS1的表达(P<0.05),而C组与B组
比较,差异无统计学意义(P0.05);C、E、F组均能够降低IL-6含量(P<0.05),
而D组与B组比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗第7天,C组能够下调
NS1表达,D组能够降低IL-6含量(P<0.05)。结论:GXM可降低IV感染后
肺部炎症,降低NS1蛋白的表达;减少促炎因子的释放,其滴鼻灌胃合用较单
一给药有优势。
流行性感冒(流感)是一種常见的急性呼吸道传染病,由流感病毒(influenza
virus,IV)感染引起,其发病率高,传染性强,人群普遍易感[1]。临床表现轻
重不一,轻者仅表现为感冒,病程短、症状轻、预后良好,重者可发展为流感病
毒性肺炎,甚则危及生命[2]。中医药在防治IV感染方面具有重要的作用,临床
多以辛凉解表或清热解毒之品治之每获较好疗效。但近年由于雾霾等环境污染及
人们生活方式的改变、饮食的偏嗜,体虚湿盛或湿热内蕴者日益增多,IV等病
原微生物极易附着于PM2.5等微尘颗粒侵袭人体,并因人的体质而从化,发为
湿热性质的病证。临床已有报道用甘露消毒丹(GanluXiaoduMicropill,GXM)
治疗IV感染取得了较好的疗效[3]。本研究从湿热蕴毒立论,探讨清热解毒、利
湿化浊的GXM滴鼻、灌胃两种不同给药途径对IV感染小鼠肺部炎症的影响。
通过观察小鼠肺组织病理炎症、肺指数、干湿比、肺组织超微结构、血清中IL-6、
TNF-α含量变化及肺组织中NS1、NF-κB表达,揭示GXM一方两用对IV感染
的效用机制。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1病毒株甲型流感病毒鼠肺适应株A/FM1/47(H1N1),由辽宁中医药
大学附属医院病毒室保存。
1.1.2实验动物SPF级BALB/c小鼠108只,体重(20±2)g,雌雄各半,
购买于辽宁长生生物技术有限公司,生产合格证号:SCXK(辽)2013-009,使
用合格证号:SYXK(辽)2015-0001。
1.1.3药物及制备GXM药物组成:滑石、黄芩、茵陈、石菖蒲、川贝母、
木通、藿香、连翘、白蔻仁、薄荷、射干,中药饮片购于辽宁中医药大学附属医
院门诊药局,经辽宁中医药大学中药分析教研室鉴定为正品。饮片以8倍量70%
乙醇加
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