人类IDH1基因突变检测试剂盒（荧光PCR法）（CSZ2100196）.docx

受理号：CSZ2100196

体外诊断试剂产品注册技术审评报告

产品中文名称：人类IDH1基因突变检测试剂盒

（荧光PCR法）

产品管理类别：第三类

申请人名称：厦门艾德生物医药科技股份有限公司

国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心

目录

基本信息 3

一、申请人名称 3

二、申请人住所 3

三、生产地址 3

技术审评概述 4

一、产品概述 4

二、临床前研究概述 5

三、临床评价概述 9

四、产品受益风险判定 11

综合评价意见 13

基本信息

一、申请人名称

厦门艾德生物医药科技股份有限公司

二、申请人住所

厦门市海沧区鼎山路39号

三、生产地址

厦门市海沧区鼎山路39号

技术审评概述

一、产品概述

（一）产品主要组成成分

本试剂盒含有IDHPCR反应条、IDH混合酶、IDH阳性对照，详见表1、表2。

表1试剂盒组成

名称

主要组分

数量

IDHPCR反应条

引物、探针、镁离子、dNTPs

12条

IDH混合酶

TaqDNA聚合酶、UNG酶

45μL

IDH阳性对照

质粒DNA、野生型DNA

250μL

表2IDHPCR反应条的组成

管号

检测试剂

体积

荧光信号

检测区段

碱基变化

1

IDH反应液1

35μL

FAM，VIC

IDH1外显子4

394CA，395GA

2

IDH反应液2

35μL

FAM，VIC

IDH1外显子4

394CT，395GT

3

IDH反应液3

35μL

FAM，VIC

IDH1外显子4

394CG

8

IDH外控反应液

35μL

FAM

IDH2外显子3

/

备注：不同批次试剂不可混用。

（二）产品预期用途

本试剂盒用于体外定性检测急性髓系白血病（AML）患者骨髓样本DNA中人类异柠檬酸脱氢酶1（IDH1）突变基因，检测的突变位

点为：394CA、395GA、394CT、395GT和394CG，用于艾伏尼布片（Tibsovo片）的伴随诊断。

检测结果仅供临床参考，不应作为患者个体化治疗的唯一依据，临床医生应结合患者病情、药物适应症、治疗反应及其他实验室检测指标等因素对检测结果进行综合判断。

（三）产品包装规格

8测试/盒。

（四）产品检验原理

本试剂盒基于扩增阻碍突变系统和荧光PCR技术实现骨髓样本DNA中IDH1基因突变的检测。

本试剂盒针对IDH1基因突变位点设计特异的突变检测引物，PCR扩增时，由于该引物3末端的碱基与突变型模板完全配对，引物延伸并扩增出突变模板；而与野生型模板由于不能完全配对，引物的延伸被阻断，野生型模板扩增被抑制，从而实现IDH1基因突变的检测。本试剂盒基于荧光PCR技术，通过FAM标记的荧光探针，在1~3号管实现IDH1基因突变的实时检测，在8号外控管实现IDH2基因外显子3区段的检测，用于监控样本质量；另外，反应体系中还包含检测人类IDH1基因保守区域（IDH1基因外显子6区段）的引物和HEX标记的荧光探针，作为内控试剂用于结果判读及监控样本的质量。本试剂盒PCR扩增反应系统同时含有UNG酶，可以选择性断裂含有dU的PCR片段中的尿嘧啶糖苷键，有效降低因PCR产物污染产生的假阳性。

二、临床前研究概述

（一）主要原材料

1.主要原材料的选择

本产品的主要原材料包括引物、探针、DNA聚合酶、UNG酶和dNTP，这些原材料均为外购方式获得。

自行设计的引物和探针委托专业的合成公司合成，并经HPLC纯化获得；DNA聚合酶、UNG酶和dNTPs等均由有资质的原料供应商提供。通过功能性试验，申请人筛选出最佳原材料和供应商，同时制定了各主要原材料质量标准并经检验合格。

2.企业参考品和对照品的设置情况

申请人设计了完整的企业参考品，包括阳性参考品、阴性参考品、最低检测限参考品和精密度参考品，参考品均采用临床样本制备而成。阳性参考品共13支，包括不同突变比例下试剂盒可检出的所有突变类型。阴性参考品共9支，7支为野生型人基因组DNA，另外含1例非人基因组样本和1例试剂盒检测范围外的IDH1基因突变阳性细胞系样本。检测限参考品共5支，包括试剂盒可检出的所有突变类型。精密度参考品共5支，包括阴性精密度参考品、不同突变比例所有突变类型的阳性精密度参考品。产品设置了阳性对照（PC）和阴性对照（NTC，自备纯化水），用于检测过程中试剂盒和仪器的质量控制。

（二）生产工