糖和苷类化合物 (4).ppt

苷的甲基化反应常用的方法主要有以下四种，前两种为经典的方法,后两种是半微量的现代方法。(1)Haworth法：用硫酸二甲酯和氢氧化钠(或碳酸钠、碳酸钾)，可使醇羟基甲基化。其缺点是甲基化能力较弱，如果欲进行全甲基化反应，必须进行多次反应才能达到目的，(2)Purdie法：用碘甲烷和氧化银为试剂(一般可在丙酮或四氢呋喃中进行)，可使醇羟基甲基化，但因氧化银具有氧化作用，只能用于苷的甲基化．而不能用于还原糖的甲基化。七、糖链结构的测定第96页,共109页，5月，星期六，2024年，5月(3)Kuhn改良法：在二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，加入碘甲烷和氧化银或硫酸二甲酯及氢氧比钡(或氧化钡)，在搅拌下进行甲基化。本法的缺点是反应较缓慢。(4)Hakomari法(箱守法)：在二甲基亚砜(DMSO)溶液中，加入氢化钠，以碘甲烷进行甲基化反应。其反应机理是二甲亚砜与氢化钠首先生成甲基亚磺酰阴碳离子，然后在甲基亚磺酰阴碳离子的存在下进行甲基化反应，由于亚磺酰阴碳离子具有强脱质子作用，使苷中糖上的醇羟基脱氢，从而使全甲基化反应可以迅速完成，二甲亚砜只起催化作用:七、糖链结构的测定第97页,共109页，5月，星期六，2024年，5月此法反应迅速、完全、无需特殊装置、可在室温下连续反应，是目前最常用的全甲基化方法。但因在反应中，所用二甲亚砜和NaH均呈强碱性，故分子中有酯键的苷类不宜用本法，而应采用Kuhn改良法进行全甲基化。七、糖链结构的测定第98页,共109页，5月，星期六，2024年，5月(二)波谱分析法1．MS法主要利用质谱中归属于有关糖基的碎片离子峰或各种分子离子脱糖基的碎片离子峰，可对糖的连接顺序作出判断。在EI-MS中，由于苷类是非挥发性的，常制备成全乙酰化物、全甲基化物或全三甲基硅醚化物等进行测定。在它们的MS谱中，常出现各种特征性的糖基离子蜂．全乙酰化的单糖及低聚糖的特征性碎片离子峰，这些特征峰的存在均可提示该糖处于糖链的末端位置。利用苷的FD-MS谱或FAB-MS谱，有时亦能确定糖与糖之间的连接顺序。七、糖链结构的测定第99页,共109页，5月，星期六，2024年，5月五、苷键构型的确定糖与苷元之间的苷键及糖与糖之间的苷键属于缩醛键，因而都存在有糖端基碳原子的构型问题。确定苷键构型的方法主要有以下几种。(一)利用酶水解进行测定如麦芽糖酶一般能水解的为α-苷键，能被苦杏仁苷酶水解的大多为β-苷键。利用酶解法推断苷键构型时需注意并非所有的α-苷键都能被苦杏仁苷酶所水解。(二)利用NMR谱法测定1利用端基质子的偶合常数2利用α-苷键和β-苷键的端基碳的化学位移差别3利用2DNMR谱七、糖链结构的测定第100页,共109页，5月，星期六，2024年，5月一、概述二、单糖的立体化学三、糖和苷的分类四、苷类化合物的理化性质五、苷键的裂解六、糖的核磁共振性质七、糖链的结构测定八、糖和苷的提取分离第三章糖和苷第101页,共109页，5月，星期六，2024年，5月一、提取植物体内，苷类常与水解苷类的酶共存，因此在提取时，必须抑制酶的活性，常用的方法是在中药中加入CaCO3,或用甲醇、乙醇或沸水提取，同时提取过程中要尽量勿与酸或碱接触，以免苷类水解，如不加注意，则往往提到的就不是原生苷。在提取时还必明确提取的目的即要求提取的是原生苷、次生苷，还是苷元，然后根据要求进行提取，因为其提取方法是有差别的。各种苷类，由于苷元的结构不同，所联接的糖也不一样，很难有统一的提取方法，如用极性不同的溶剂循极性从小到大次序提取，则在每一提取部分，都可能有苷的存在。以下是最常用的提取方法。八、糖及苷类的提取和分离第102页,共109页，5月，星期六，2024年，5月流程图八、糖及苷类的提取和分离第103页,共109页，5月，星期六，2024年，5月二、分离方法1溶剂处理法2铅盐沉淀法3大孔树脂处理法4柱色谱分离法三、检识方法（一）理化检识1.Molish反应2.Felling反应及Tollen’s反应3.水解反应（二）色谱检识PcandTLC糖显色：苯胺-邻苯二甲酸八、糖及苷类的提取和分离第104页,共109页，5月，星期六，2024年，