糖链结构测定及糖的提取分离.ppt

关于糖链结构测定及糖的提取分离组成苷的苷元和单糖的鉴定将苷用稀酸或酶进行水解，使生成苷元和各种单糖苷元的结构鉴定在有关章节中逐一介绍。组成苷中糖的种类鉴定通常采用PC、TLC等方法对水解液进行鉴定。糖类的PC常用的展开剂大多为含水的溶剂系统，如正丁醇-醋酸-水(4:1:5)，EtOAc-吡啶-水(2:1:2)等，其Rf值与溶剂的含水量有关。七、糖链结构的测定第2页,共19页，5月，星期六，2024年，5月苷中糖的数目的测定质谱：苷分子量-苷元分子量，求出糖的数目。核磁：氢谱中端基质子信号数(5ppm左右)，碳谱中端基碳信号的数目(90-112ppm)。七、结构的测定第3页,共19页，5月，星期六，2024年，5月苷元和糖之间连接位置的确定13C-NMR：苷化位移规律，将苷和苷元的碳谱相比较。成苷后，α-C约+8ppm,β-C约-4ppm二维核磁共振谱(如HMQCCOSY及HMBC谱)等技术广泛用于确定连糖位置。七、结构的测定第4页,共19页，5月，星期六，2024年，5月糖与糖的连接位置的确定全甲基化物进行甲醇解，分析其甲醇解产物。七、糖链结构的测定第5页,共19页，5月，星期六，2024年，5月采用的方法通常是将这些甲醚化的单糖进行了TLC鉴定，并与标准品对照。近来亦有用GC-MS联用仪对其进行鉴定的报道。全甲基化甲醇解：七、糖链结构的测定第6页,共19页，5月，星期六，2024年，5月七、糖链结构的测定如：已知某二糖甲醇解后得到下列产物，请推测该二糖的结构（连接位置）全甲基化甲醇解第7页,共19页，5月，星期六，2024年，5月甲基化反应(1)Haworth法：用硫酸二甲酯和氢氧化钠(或碳酸钠、碳酸钾)，可使醇羟基甲基化。其缺点是甲基化能力较弱，如果欲进行全甲基化反应，必须进行多次反应才能达到目的，(2)Purdie法：用碘甲烷和氧化银为试剂(一般可在丙酮或四氢呋喃中进行)，可使醇羟基甲基化，但因氧化银具有氧化作用，只能用于苷的甲基化．而不能用于还原糖的甲基化。七、糖链结构的测定第8页,共19页，5月，星期六，2024年，5月(3)Kuhn改良法：在二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，加入碘甲烷和氧化银或硫酸二甲酯及氢氧比钡(或氧化钡)，在搅拌下进行甲基化。本法的缺点是反应较缓慢。(4)Hakomari法(箱守法)：二甲基亚砜(DMSO)，氢化钠，碘甲烷七、糖链结构的测定第9页,共19页，5月，星期六，2024年，5月此法反应迅速、完全、无需特殊装置、可在室温下连续反应，是目前最常用的全甲基化方法。但因在反应中，所用二甲亚砜和NaH均呈强碱性，故分子中有酯键的苷类不宜用本法。七、糖链结构的测定第10页,共19页，5月，星期六，2024年，5月酶水解转化糖酶--------水解β-果糖苷键麦芽糖酶--------水解α-葡萄糖苷键杏仁苷酶--------水解β-葡萄糖苷键,专属性较低纤维素酶--------水解β-葡萄糖苷键NMR谱法测定利用端基质子的偶合常数如：5ppm(1H,d,J=7Hz)为下面哪个结构？七、糖链结构的测定-苷键构型的确定第11页,共19页，5月，星期六，2024年，5月一、提取植物体内，苷类常与水解该苷的酶共存。提原生苷：先杀酶。常用的方法是在中药中加入CaCO3,或用甲醇、乙醇或沸水提取，同时提取过程中要尽量勿与酸或碱接触，以免苷类分解。提苷原：可利用酶活性八、糖及苷类的提取和分离第12页,共19页，5月，星期六，2024年，5月八、糖及苷类的提取和分离化合物的极性功能基的种类：(-COOH)(-OH)(–C=O)(-COOR)-O-(-CnHm)极性功能个数分子内氢键降低极性化合物大小小分子的极性大于大分子的极性常用溶剂极性：水甲醇乙醇丙酮乙酸乙酯氯仿乙醚己烷H2OMeOHEtOHCH3COCH3EtOAcCHCl3EtOEtCH3(CH2)4CH3第13页,共19页，5月，星期六，2024年，5月流程图八、苷类的提取和分离第14页,共19页，5月，星期六，2024年，5月糖和苷的提取分离药材水水提液3倍量以上乙醇醇水溶液沉淀（苷）（多糖）第15页,共19页，5月，星期六，2024年，5月多糖提取分离

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