备战2025年高考二轮复习 生物（通用版） 大单元8 生物技术与工程 层级三核心素养突破练 Word版含解析.pdfVIP

层级三核心素养突破练

1.(2024·江苏盐城模拟)(11分)为研究编码铁运输相关蛋白的基因A(约963bp)在拟南芥缺铁胁迫响

应中的作用,需要构建超量表达A的拟南芥转基因株系。质粒的结构如图2所示。回答下列问题。

(1)图1中,过程①指的是从拟南芥中提取RNA,经催化,合成cDNA;过程②指的是以

cDNA为模板,通过PCR扩增目的基因,需要在引物的端,加入限制酶、

的识别序列。

(2)构建表达载体时,将PCR产物与质粒分别双酶切后,先进行琼脂糖凝胶电泳,将目标片段与无关片

段分离,从琼脂糖凝胶中只回收目标片段,再用DNA连接酶进行连接,以避

免。

(3)将转化后得到的单克隆农杆菌进行PCR鉴定,结果如图3所示,根据此结果,科研人员欲选择1、2

号菌进行测序,原因是。

(4)将拟南芥的直接浸没在含有农杆菌的溶液中一段时间,然后培养植株,将得到的种子接

种在含有(填抗生素名称)的固体培养基上培养,以筛选出成功导入目的基因的阳性植株。

(5)提取转基因及野生型植株的蛋白质进行电泳检测,结果如图4所示。若其中号为转

基因植株的蛋白质电泳结果,则说明成功构建超量表达A的拟南芥转基因株系。

2.(2024·天津二模)(13分)磷脂酸(PA)是调节植物生长发育和逆境响应的重要信使物质。为了解植物

细胞中PA的动态变化,研究人员用无缝克隆技术将高度专一的PA结合蛋(PABD)基因与绿色荧光

蛋(GFP)基因融合,构建有效监测细胞PA变化的荧光探针,并测定拟南芥细胞内PA含量。无缝克

隆技术连接DNA片段的机理和构建荧光探针表达载体的过程如图所示,请回答下列问题。

注:bar为草胺膦抗性基因;Kanr为卡那霉素抗性基因。

(1)无缝克隆时,T5核酸外切酶(从核苷酸链的外侧向内侧剪切核苷酸)沿(填“5→3”或

“3→5”)的方向水解DNA,其目的是形成。T5核酸外切酶催化的最

适温度为37℃,而过程①选择的温度为50℃,目的是,防止过度水解DNA。

(2)过程②两个片段复性后存在“缺口”的原因是,过程

③所需的酶有。

(3)与传统的酶切再连法相比,无缝克隆技术构建重组质粒的优点有(多选)。

A.不受限制酶酶切位点的限制

B.不需要使用PCR技术扩增目的基因

C.不会出现目的基因的反向连接和自身环化

(4)PCR扩增GFP基因时需依据的部分核苷酸序列设计引物R2。已知引物F1的

碱基序列是5-TCCGGACTCAGATCTCGAGC-3,据图分析,扩增目的片段的所用的引物R2可对应

下表中的(填序号)。

5-

①AGCTATAGTTCTAGATCTAGATTAACTAGTCTTAGTG

GCG-3

5-

②TATCGATGGCGCCAGCTGAGGATGGTGAGCAAGGGC

GACA-3

5-

③GCTCGAGATCTGAGTCCGGACTTGTACAGCTCGTCCA

TAA-3

(5)利用农杆菌花序侵染法转化拟南芥,将获得的种子进行表面消毒,均匀铺在含有的培养

基上进行筛选和鉴定,将筛选得到的种子种植可得到转基因拟南芥,通过观测转基因拟南芥根尖细胞

中,了解PA的分布和含量。

层级三核心素养突破练

1.(2024·江苏盐城模拟)(11分)为研究编码铁运输相关蛋白的基因A(约963bp)在拟南芥缺铁胁迫响

应中的作用,需要构建超量表达A的拟南芥转基因株系。质粒的结构如图2所示。回答下列问题。

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