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LTR对J亚群禽白血病病毒感染的影响
冯少珍;李娇;吴晓婵;曹伟胜;廖明
【摘要】为探讨LTR基因在骨髓瘤病变型J亚群禽白血病病毒(ALV-J)NX0101
致病中的作用,利用反向遗传将血管瘤病变型ALV-JHN06株中两端LTR元件替换
至NX0101株的相应位置,拯救出重组病毒NX-HNLTR株.人工接种7日龄SPF雏
鸡,分别检测NX0101株和NX-HNLTR株对鸡体的影响.感染鸡生长都较慢.感染
NX0101株的鸡,胸腺指数和腔上囊指数明显比对照组低,脾脏指数与对照组相比波
动较大,骨髓和脾脏在攻毒后3周可检测到病毒整合到基因组中,胸腺和腔上囊在攻
毒后6周才检测到.感染NX-HNLTR株的鸡脾脏指数明显比对照组低,攻毒后2周
可检测到病毒整合到脾脏基因组中,骨髓和胸腺分别在攻毒后3周和6周检测到.结
果提示,LTR对NX0101株感染鸡的免疫器官有一定的影响.
【期刊名称】《中国兽医杂志》
【年(卷),期】2012(048)003
【总页数】4页(P3-6)
【关键词】J亚群禽白血病病毒;骨髓瘤病变型;长末端序列;病毒基因整合
【作者】冯少珍;李娇;吴晓婵;曹伟胜;廖明
【作者单位】华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广
东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,
广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642
【正文语种】中文
【中图分类】S852.65+9.3
J亚群禽白血病病毒(SubgroupJavianleukosisvirus,ALV-J)属于禽α反
转录病毒属。Payne等在1991年首次在肉鸡中发现ALV-J[1],我国在1999
年证实ALV-J的存在[2-3],2002年,首次发现蛋鸡存在J亚群禽白血病
[4-5]。但不到10年的时间,全国已有相当多的鸡场发现该病,其主要临床表
现为骨髓瘤、血管瘤、淋巴瘤、纤维肉瘤等多种肿瘤[6],造成鸡群免疫抑制,
并成为其他疾病的诱因。ALV-J可经种蛋垂直传播和水平传播,先天感染的子代
鸡发生免疫耐受,导致免疫抑制。
长末端重复序列(LTR)是反转录病毒基因组两端的一段重复序列(5′LTR和
3′LTR)。LTR与ALV的复制、转录、宿主范围、组织细胞嗜性及致瘤谱系的改变
有关[7-12]。为了探讨LTR在骨髓瘤病变型ALV-J毒株NX0101产生免疫
抑制中的作用,本试验通过反向遗传和搭桥PCR方法拯救重组病毒,将血管瘤病
变型毒株HN06中两端的LTR序列替换至NX0101毒株的相应位置,通过人工后
天感染模型,研究ALV-J在试验鸡体内分布及造成机体和免疫器官损伤的状况。
1材料与方法
1.1毒种和细胞ALV-J骨髓瘤病变型NX0101克隆株由山东农业大学动物科技学
院崔治中教授惠赠。ALV-JHN06株分离自发生血管瘤病变的病鸡内脏,通过反
向遗传方法获得HN06克隆株[13]。DF-1细胞和抗ALV-Jgp85单克隆抗
体JE9由扬州大学兽医学院秦爱建教授惠赠。
1.2重组质粒的构建按照张纪元等报道的方法[14],将NX0101株前体基因组
cDNA(GenBank登录号DQ115805)克隆至载体pMDTM18-T中,获得重
组质粒pMDNX0101。根据NX0101株和HN06株前体基因组序列设计特异性引
物(表1),通过搭桥PCR方法将HN06株前体基因组两端的LTR序列(5′端1
-325bp,3′端7309-7633bp)分别替换至NX0101株前体基因组的相应位置,
获得含有完整前体基因组结构的重组质粒pNX-HNLTR(图1)。
表1引物序列
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