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LTR对J亚群禽白血病病毒感染的影响

冯少珍;李娇;吴晓婵;曹伟胜;廖明

【摘要】为探讨LTR基因在骨髓瘤病变型J亚群禽白血病病毒(ALV-J)NX0101

致病中的作用,利用反向遗传将血管瘤病变型ALV-JHN06株中两端LTR元件替换

至NX0101株的相应位置,拯救出重组病毒NX-HNLTR株.人工接种7日龄SPF雏

鸡,分别检测NX0101株和NX-HNLTR株对鸡体的影响.感染鸡生长都较慢.感染

NX0101株的鸡,胸腺指数和腔上囊指数明显比对照组低,脾脏指数与对照组相比波

动较大,骨髓和脾脏在攻毒后3周可检测到病毒整合到基因组中,胸腺和腔上囊在攻

毒后6周才检测到.感染NX-HNLTR株的鸡脾脏指数明显比对照组低,攻毒后2周

可检测到病毒整合到脾脏基因组中,骨髓和胸腺分别在攻毒后3周和6周检测到.结

果提示,LTR对NX0101株感染鸡的免疫器官有一定的影响.

【期刊名称】《中国兽医杂志》

【年(卷),期】2012(048)003

【总页数】4页(P3-6)

【关键词】J亚群禽白血病病毒;骨髓瘤病变型;长末端序列;病毒基因整合

【作者】冯少珍;李娇;吴晓婵;曹伟胜;廖明

【作者单位】华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广

东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,

广东广州510642;华南农业大学兽医学院,广东广州510642

【正文语种】中文

【中图分类】S852.65+9.3

J亚群禽白血病病毒（SubgroupJavianleukosisvirus，ALV－J）属于禽α反

转录病毒属。Payne等在1991年首次在肉鸡中发现ALV－J［1］，我国在1999

年证实ALV－J的存在［2－3］，2002年，首次发现蛋鸡存在J亚群禽白血病

［4－5］。但不到10年的时间，全国已有相当多的鸡场发现该病，其主要临床表

现为骨髓瘤、血管瘤、淋巴瘤、纤维肉瘤等多种肿瘤［6］，造成鸡群免疫抑制，

并成为其他疾病的诱因。ALV－J可经种蛋垂直传播和水平传播，先天感染的子代

鸡发生免疫耐受，导致免疫抑制。

长末端重复序列（LTR）是反转录病毒基因组两端的一段重复序列（5′LTR和

3′LTR）。LTR与ALV的复制、转录、宿主范围、组织细胞嗜性及致瘤谱系的改变

有关［7－12］。为了探讨LTR在骨髓瘤病变型ALV－J毒株NX0101产生免疫

抑制中的作用，本试验通过反向遗传和搭桥PCR方法拯救重组病毒，将血管瘤病

变型毒株HN06中两端的LTR序列替换至NX0101毒株的相应位置，通过人工后

天感染模型，研究ALV－J在试验鸡体内分布及造成机体和免疫器官损伤的状况。

1材料与方法

1.1毒种和细胞ALV－J骨髓瘤病变型NX0101克隆株由山东农业大学动物科技学

院崔治中教授惠赠。ALV－JHN06株分离自发生血管瘤病变的病鸡内脏，通过反

向遗传方法获得HN06克隆株［13］。DF－1细胞和抗ALV－Jgp85单克隆抗

体JE9由扬州大学兽医学院秦爱建教授惠赠。

1.2重组质粒的构建按照张纪元等报道的方法［14］，将NX0101株前体基因组

cDNA（GenBank登录号DQ115805）克隆至载体pMDTM18－T中，获得重

组质粒pMDNX0101。根据NX0101株和HN06株前体基因组序列设计特异性引

物（表1），通过搭桥PCR方法将HN06株前体基因组两端的LTR序列（5′端1

－325bp，3′端7309－7633bp）分别替换至NX0101株前体基因组的相应位置，

获得含有完整前体基因组结构的重组质粒pNX－HNLTR（图1）。

表1引物序列