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ABO以外
重要的血型系统及其抗体2005年,29个红细胞血型系统274个抗原除ABO外与输血有关的最重要的血型系统之一01最重要的五种抗原C、c、D、E、e01根据D抗原是否存在,一般将Rh系统定义为Rh阳性:D抗原阳性Rh阴性:D抗原阴性01Rh血型系统Rh阴性知多少15%4%0.4%Rh血型对输血影响有多大?ABO血型发现后40年才发现Rh血型无数Rh阴性人输了Rh阳性血后无反应Levinelandsteinerwiener输血死亡主要原因分析
(美国,1980)保证人们用血(输血),包括血液、血液成分或血液制品的安全、有效。输血是一项广泛应用且十分重要的治疗手段恢复及维持机体的氧(O2)供应治疗临床上严重的失血性疾病治疗血液系统紊乱性疾病新生儿溶血病的治疗免疫血液学能解决什么问题如何保证输血安全有效检测献血员和用血者血液中的抗原和抗体,选择抗原,抗体尽可能相容的血液进行输血:红细胞定型血浆(血清)抗体筛查/抗体鉴定,红细胞的直接抗人球蛋白试验和吸收放散试验献血员与受血者之间的交叉配血制备用于输血的成分血献血员的筛查:肝功能,传染性疾病评价溶血性贫血母婴相容性检测我国的采供血程序
及输血前检测志愿献血员血液中心(中心血站)初检复检医院输血筛选合格献血员问卷快速测试传染病检测:HBsAg,HCV,HIV,ALT,Syphilis红细胞定型(正定)采血进口或国产试剂随机检测输血前检测(1)住院患者血型定型(正定)(2)用血患者血型在此定型(正反定型),(3)交叉配血,抗体筛查,抗体鉴定多数医院输血前不再进行传染病检测红细胞血型血清学检测技术DCBA盐水凝集法低离子强度盐水法酶技术凝聚胺技术E抗人球蛋白检测法F柱凝集技术检测法红细胞和抗血清在盐水溶液中直接反应特点是操作简便,设备简单,缺点是影响因素多,灵敏度低01孵育30分钟02一、盐水凝集法通过降低介质溶液的离子强度,减少红细胞外围离子云的强度,促进IgG分子在两个红细胞间桥联,而促进凝集特点是缩短抗原抗体反应时间,提高反应灵敏度孵育1分钟二、低离子强度盐水法03主要用于一些不完全抗体的检测02同时改变红细胞膜表面结构,使某些隐蔽的抗原暴露,从而增强凝集反应01利用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面唾液酸,使红细胞失去电荷,缩小细胞间距离三、酶技术四、凝聚胺技术利用多聚季胺盐在介质溶液中产生大量正电荷中和红细胞表面的负电荷,减少红细胞间排斥,促进凝集柱凝集技术原理五、柱凝集技术检测法是微柱凝集技术与上述所有技术相结合的产物1986年由法国人Dr.YvesLappierre发明1994年获得美国FDA认证,目前在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床六、抗人球蛋白试验
Coombs试验在盐水凝集法或低离子强度盐水法的基础上,加入抗人球蛋白抗体,通过抗人球蛋白抗体的特异性桥连作用,促进红细胞的凝集抗人球蛋白实验+Anti-HumanGlobulin(AHG)试剂致敏红细胞的IgG抗体或补体成份加入抗人球蛋白试剂后形成肉眼可见的凝集反应抗人球蛋白实验肉眼可见2.AHG反应1.红细胞致敏反应肉眼不可见直接抗人球蛋白实验(DAT)间接抗人球蛋白实验(IDAT)红细胞在体内(invivo)即被不规则抗体所致敏,因此直接加入抗人球试剂即可进行测定;如某些过敏性药物及引起溶血性输血反应的抗体、自身抗体等红细胞在体外(invitro)首先被不规则抗体或抗血清试剂所致敏,然后再加入抗人球试剂进行测定;如抗体筛查、抗体鉴定、交叉配血等抗人球蛋白实验010203提供临床所需的血液成份提供血型相符或配合的血液为临床提供血型相关的检测诊断医院输血科的主要职责输血前测试流程常用输血前测试方法1.平板法-细胞浓度适宜,避免交叉污染,及时观察结果2.试管法-加样顺序,反应条件,洗涤细胞注意事项3.微量板法-加样和振荡避免交叉污染4.柱凝集法-避免假阳性,使用前观察凝胶板常用输血前检测项目ABO血型鉴定Rh血型鉴定红细胞血型抗体筛查/鉴定交叉配血试验HDN血型血清学检查正定型用已知抗-A或抗-B定型试剂来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原反定型用已知A1型细胞和B型细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B正反定型结果不一致或有疑问,需进一步行ABO血型确认试验。方法:红细胞凝集试验A
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