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肉牛胚胎移植的要点
作者:陈文龙
来源:《现代畜牧科技》2015年第10期
陈文龙
(黑龙江省方正县畜牧兽医局150800)
肉牛胚胎移植是指从一头配种后的优良肉用母牛体内取出早期胚胎,将其移植到另一头生
理状态基本相同的肉用母牛体内,并在其体内继续发育形成胎儿,也叫做借腹怀胎。一般将提
供胚胎的母牛称为供体,接受胚胎的母牛称为受体。优良的肉用犊牛,不仅由公牛决定,也依
赖于母牛,后代犊牛的生产性能由其父母代决定,遗传物质则来源于供体母牛以及与之配种的
公牛,即胚胎的遗传特性由双亲决定;而胚胎发育所需的营养物质由受体母牛提供,即只在胚
胎生长发育发挥作用。
1选择供体牛和受体牛
供体母牛要选择优良肉牛品种,遗传性能稳定,无遗传缺陷,生殖器官发育正常,具有较
高的繁殖力,发情周期正常,配种指数、受胎性及受胎率均较好,连续多年保持一年产一犊。
如果母牛长期空怀、患子宫内膜炎或发情周期不明显,则都不能选作供体牛。供体母牛生殖器
官发育良好,使其进行超数排卵产生良好的反应,增加排卵数量,并获得质量良好的受精卵。
2同期发情和超数排卵
同期发情技术是肉牛胚胎移植中的一个主要环节,其可为超数排卵的供体母牛在同一时间
内准备足够可用于移植的受体,还能够使同期化处理的供体牛群和受体牛群再次同期化,从而
确保供、受体母牛的生理状态保持相同。常用的同期发情方法是使用前列腺素-2α诱导受体母
牛发情,且试验表明注射两次效果要优于注射一次。受体母牛发情期8~15天,亘肠检查其发
情状态,此时第一次肌肉注射4mL前列腺素-2α;间隔11天,第二次肌肉注射前列腺素-2α,
且此次注射必须在供体母牛注射前列腺素-2α的前一天进行。
肉牛进行胚胎移植时,要对供体母牛进行超数排卵处理,从而一次性获得多枚胚胎。一般
来说,供体母牛排卵量保持10个左右较好。母牛排卵量过多则容易造成其卵巢发生囊肿,以及
排卵效果不稳定等不良后果;排卵量太少则会降低胚胎移植的意义,同时还会导致收集胚胎比
较困难。超数排卵一般是在供体母牛预计发情到来之前4天,也就是发情周期的第16天注射促
性腺激素,然后在出现发情的当天注射绒毛膜促性腺激素。
3胚胎的采集与检查
将供体母牛出现发情的当天作为第O天,采集胚胎在其发情后的第7天进行。将冲洗液通
过二路式导管冲卵器注入供体母牛子宫角内,之后导出冲洗液并进行充分收回,将从生殖道内
冲出的胚胎收集在经过灭菌消毒的器皿中。收集到的胚胎要采用高倍显微镜进行检查,观察其
发育阶段和形态。现在,基本采用形态学的方法来鉴定胚胎质量,并将胚胎分为A、B、C和D
级。A级是指优秀胚胎,其形态正常,卵裂球清晰、整齐、紧密,发育程度与日龄一致;B级是
指良好胚胎,卵裂球比较紧密、整齐,稍微不匀,并有个别卵裂球游离;C级是指一般胚胎,
卵裂球不十分匀称,发育较慢,出现变形;D级是指不良胚胎,大部分卵裂球异常、变形,且
发育缓慢,其中可用于移植的胚胎是A级和B级胚胎。
4胚胎的保存、解冻与输入
采集的胚胎一般进行冷冻保存,使其长期具有活力。可选择常规冷冻法,先将胚胎放人防
冻液中进行一段时间的平衡,装管后以每分钟降低0.3~0.5℃的速度降低至-7℃,植冰后温度
缓慢降低至-35℃,平衡lOmin后迅速让入液氮中保存,该方法现在已经成熟,且大多数哺乳动
物依旧采用这种传统的平衡冷冻法进行胚胎保存;直接冷冻法,基本与常规冷冻法类似,只是
细管中的稀释液和冷冻液分开,直接冷冻胚胎,是一种比较简单的方法。
胚胎解冻时,可选择一步法解冻和常规解冻。一般常用的是一步法解冻,即从液氮罐中取
出细管,室温缓解10秒后放人32~35℃温水中进行10秒水浴,将封口端剪去,装枪后进行移
植。输胚采用直肠把握法,输胚枪经过子宫颈后,枪芯向前推,排掉长度为0.5~1.Ocm的液
体段,冲掉在过子宫颈时黏液、出血对输胚枪枪孔的堵塞和污染,然后插入近侧的子宫角前
1/3处进行输胚。
5术后观察
胚胎移植后,要注意观察受体和供体母牛的健康状况以及在推测时间内是否正常发情。对
于供体母牛,在下一次发情时即可正常配种,如果仍旧将其作为供体,则通常需要2~3个月才
能够再次进行超数排卵。对于受体母牛,如过移植后出现发情,说明移植失败,也许是胚胎吸
收、丢失、死亡或有缺陷,也可能是受体母牛的子宫环境不适宜胚胎发育;如果未表现发情,
则需要继续观察3~5个情期,并
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