生物-动物细胞培养.pdfVIP

动物细胞培养

[高中生物]

1.阐明动物细胞培养的条件和过程。

2.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。

一、动物细胞培养的条件和过程

1．动物细胞工程常用技术

(1)常用技术：动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等。

(2)基础：动物细胞培养。

2．动物细胞培养

(1)概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，

让这些细胞生长和增殖的技术。

(2)培养条件

①营养

a．合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。

b．天然成分：血清。

c．培养液：即液体培养基。

②无菌、无毒的环境

a．对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。

b．在无菌环境下进行操作。

c．培养液需定期更换，以清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

③温度、pH和渗透压

a．温度：以36.5℃±0.5℃为宜。

b．pH：以pH为7.2～7.4为宜。

c．适宜的渗透压。

④气体环境

a．O作用：细胞代谢所必需的。

2

b．CO主要作用：维持培养液的pH。

2

c．气体组合：95%空气＋5%CO。

2

(3)培养过程

②过程

(4)相关概念

①细胞贴壁：悬液中分散的细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。

②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。

③原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。

④传代培养：分瓶后的细胞培养。

判断正误

(1)动物细胞培养体现了动物细胞的全能性()

(2)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞()

(3)悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再用离心法收集

()

(4)动物细胞培养时，O是细胞代谢所必需的，CO的主要作用是维持培养液的pH()

22

答案(1)×(2)×(3)√(4)√

探讨点动物细胞培养

1．动物细胞培养的原理是细胞增殖。

2．幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，

哪些细胞更易于培养？为什么？

提示幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养，原因是这些细胞分裂能力强。

3．动物细胞培养时，除了添加糖类、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需添加血清等一

些天然成分，原因是人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，血清等一些天然成分的

营养成分比较齐全，可以弥补人工培养基的不足。

4．进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么？用胃蛋

白酶可以吗？为什么？

提示蛋白质；不可以；多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶(适宜pH为

1.5左右)在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适用于细胞

培养时的处理。

核心归纳

1．动物细胞培养的相关处理

(1)使细胞分散开的原因：一是能保证细胞所需要的营养供应；二是能保证细胞内有害代谢

物的及时排出。

(2)使用胰蛋白酶时，要控制好作用时间，因为胰蛋白酶不仅能分解细胞间的蛋白质，长时

间作用还会分解细胞膜蛋白等，对细胞造成损伤。进行动物细胞培养时不能用胃蛋白酶分散

细胞，主要是因为pH不合适。

(3)动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶，第一次使用的目的是

使组织细胞分散开；贴壁细胞传代培养时使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，分散成单

个细胞，便于分瓶后继续培养。

分瓶

(4)①悬浮生长细胞：原代培养→分裂受阻→离心法收集→制成细胞悬液――→传代培养。

②贴壁生长细胞：原代培养→分裂受阻→胰蛋白酶处理→离心法收集→制成细胞悬液

分瓶

――→

传代培养。

2．植物组织培养与动物细胞培养的比较

比较项目植物组织培养动物细胞培养