DBS22-019-2012 食品中单核细胞增生李斯特菌的定量检测.pdf

DBS22

DBS22/019-2012

吉林省食品安全地方标准

食品中单核细胞增生李斯特菌的定量检测

2013年发布2013年实施

吉林省卫生厅发布

前言

本标准根据GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》的要求编写。

本标准分为两种检测方法：

第一法：单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法；

第二法：MPN计数法。

其中第一法适用于污染较严重的食品，第二法适用于单核细胞增生李斯特氏菌含量较低而杂菌

含量较高的食品。

本标准负责起草单位：吉林省疾病预防控制中心、长春市疾病预防控制中心。

本标准负责起草人:刘桂华、龚云伟、李月婷、赵薇

吉林省食品安全地方标准

食品中单核细胞增生李斯特菌的定量检测

1范围

本操作程序规定了食品中单核细胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）的定量检验方法。

本操作程序适用于食品中单核细胞增生李斯特氏菌的定量检验。

2设备和材料

除微生物实验室常规无菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

2.1冰箱：2℃～5℃和-18℃。

2.2恒温培养箱：30℃±1℃、36℃±1℃。

2.3均质器。

2.4显微镜：10×～100×。

2.5电子天平：感量0.1g。

2.6锥形瓶：100mL、500mL。

2.7无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）。

2.8无菌平皿：直径90mm。

2.9无菌试管：16mm×160mm.。

2.10离心管：30mm×100mm。

2.11无菌注射器：1mL。

2.12金黄色葡萄球菌（ATCC25923）。

2.13马红球菌（Rhodococcusequi）。

2.14全自动微生物生化鉴定系统。

3培养基和试剂

3.1含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤（TSB-YE）：见附录A中A.1。

3.2含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂（TSA-YE）：见附录A中A.2。

3.3李氏增菌肉汤LB（LB1，LB2）：见附录A中A.3。

3.41%盐酸吖啶黄（acriflavineHCl）溶液：见附录A中A.3.2.1。

3.51%萘啶酮酸钠盐（naladixicacid）溶液：见附录A中A.3.2.1。

3.6PALCAM琼脂：见附录A中A.4。

3.7革兰氏染液：见附录A中A.5。

3.8SIM动力培养基：见附录A中A.6。

3.9缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲基红（MR）和V-P试验用]：见附录A中A.7。3.105%-8%羊血琼脂：

见附录A中A.8。

3.11糖发酵管：见附录A中A.9。

3.12过氧化氢酶试验：见附录A中A.10。

3.13李斯特氏菌显色培养基。

3.14APIlisteria10300生化鉴定试剂盒。

1

第一法单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法

4检验程序

单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法检验程序见图1。

检样检样

2525g(mLg(mL))样品样品+225mL+225mLPBSPBS或生理盐水或生理盐水稀释液，稀释液，

均质均质

1010倍系列稀释倍系