DB2308T+211—2024水稻稻瘟病菌孢子保存技术规范.pdf

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ICS65.020.20

CCSB05

DB2308

黑龙江省佳木斯市地方标准

DB2308/T211—2024

水稻稻瘟病菌孢子保存技术规程

2024-11-28发布2024-12-28实施

佳木斯市市场监督管理局发布

DB2308/T211—2024

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由佳木斯市农业农村局提出并归口。

本文件由佳木斯市市场监督管理局批准发布。

本文件起草单位:黑龙江省农业科学院水稻研究所。

本文件主要起草人:王桂玲、宋成艳、陆文静、韩笑、周雪松。

本文件2024年首次发布。

DB2308/T211—2024

水稻稻瘟病菌孢子保存技术规程

1范围

本文件规定了佳木斯市水稻稻瘟病病菌定义、使用设备、保存方法等。

本文件适用于佳木斯市水稻稻瘟病病菌保存技术,为更深入研究稻瘟病菌提供菌种来源。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1病原物pathogeny

稻瘟病菌:无性阶段为灰梨孢菌(学名:PyriculariaoryzaeCav.),有性阶段为灰色大角间座

壳菌(学名:MagnaporthegriseaBarr.),属子囊菌广大角间座壳属。

3.2水稻茎节ricestemnodes

水稻茎节是指水稻茎上的特定部位,这些部位是芽与叶的着生处,通常凸出或微凹下,是辨别茎枝

的主要特征。

以下简称稻节。

4材料和用具

4.1常用仪器用具

常用仪器及用具包括:剪刀、超净工作台、小试管(直径12mm,长100mm)、接种针、培养皿、

冰箱、生物显微镜、培养箱、高压灭菌器、干燥灭菌器、医用白瓷盘、变色硅胶、普通玻璃干燥器、酒

精灯、记号笔,镊子等。

4.2试剂及培养基

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DB2308/T211—2024

试剂:75%酒精、凡士林。

培养基:稻节。

5预保存菌株要求

培养在试管斜面培养基上的或培养皿里的菌种,以及高梁粒培养基上的新鲜菌种,都可以使用。

6保存方法

6.1稻节采集与备用

秋季水稻(普通水稻,不包括彩色水稻等特种稻)收获时,采集水稻植株较细的茎节,用剪刀剪成

长约3cm~5cm的稻节,且要求稻节干净无病,采集后放在干燥通风处晾干保存备用。

6.2稻节培养基的制备

选保存备用的干净稻节,保留节部,剪成长约0.5cm~1cm的小节,用蒸馏水洗净后放在容器内,

根据需要放入稻节数量,然后加入蒸馏水适量(没过稻节以上15cm),加热煮沸20min后,常温烝馏

水冷过滤至常温,然后装入小试管内,每管放10个稻节,盖上棉塞,放入高压灭菌器(蒸气灭菌器)

内温度达到121℃,灭菌40min,取出晾凉备用。

6.3接种培养

在无菌室内,把要保存的新鲜菌株切成小的菌块,接种在稻节培养基上,在试管上注明菌株编号、

接种日期,放入28℃恒温培养箱内培养,待菌丝长满稻节后,从培养箱内取出放在室内通风干燥处。

6.4变色硅胶干燥

将变色硅胶倒入玻璃培养皿或者瓷盘中,放

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