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（（完完整整版版））院院感感采采样样⽅⽅法法

空⽓、物体表⾯、医务⼈员⼿的监测

采样及检查原则采样应具有⼀定数量和代表性，采样后必须尽快对样品按要求指标进⾏检测，送检时间不得﹥6⼩时，若样

品保存在冰箱内送检时间不﹥24⼩时。

⼀、空⽓监测

1、采样时间消毒处理后，操作前

2、采样⽅法平板沉降法

（1）布点⽅法室内⾯积≤30ｍ2，设内、中、外对⾓线3点，两端距墙1⽶；室内⾯积＞30ｍ2，设东、西、南、北4⾓及中

央5点，其中东、西、南、北均距墙1⽶。洁净⼿术室9个点。

（2）采样⽅法将直径为9cm普通营养琼脂平板在室内各采样点处，采样⾼度为距地⾯0.8--1.5⽶，采样时将平板盖打开，扣

放于平板旁，暴露5-15-30分钟，盖好⽴即送检。(3)注意事项采样前，关好门、窗，在⽆⼈⾛动的情况下，静⽌10min进⾏

采样。

表4洁净⼿术室静态（空态）时空⽓采样⽅法（沉降法）

等级空⽓洁净度级别

布点要求

细菌最⼤平均浓度⼿术区周边区⼿术

区

周边区

100级1000级0.20.4

Ⅱ1000

级10000

级

0.751.5

Ⅲ10000

级100000

级

24

辅Ⅲ100000级5

(5)质控标准

Ⅰ类区域（洁净⼿术室）细菌总数≤4cfu/m3(30分钟9cm平⽫)，新风机组2d清洁⼀次，初效过滤器1-2⽉更换，中效每周检查

3个⽉更换，⾼效每年更换，末端⾼效每年检查3年更换。回风⼝每周清洁⼀次、每年更换⼀次。

Ⅱ类区域细菌总数≤4cfu/m3(15min9cm平⽫)，

Ⅲ类区域细菌总数≤4cfu/m3(5min9cm平⽫)，

⼆、医务⼈员⼿的监测

1、采样时间在接触病⼈和从事医疗活动前进⾏采样或消毒后⽴即采样。

2、采样⾯积及⽅法放被检⼈（五指并拢），⽤浸有⽆菌盐⽔的棉拭⼦在双⼿指屈⾯从指根到指端往返涂擦各2次(双⼿涂擦

⾯积约60平⽅厘⽶），并随之转动采样棉拭⼦，剪去操作者⼿接触部位，将棉拭⼦投⼊5ml⽆菌盐⽔试管内，⽴即送检。

3、质控标准

⼯作⼈员⼿卫⽣细菌总数≤10cfu/cm2。

外科⼿卫⽣细菌总数≤5cfu/cm2，。

三、物体表⾯监测

1、.采样时间在消毒处理后4⼩时内进⾏采样。

2、.采样⽅法⽤5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表⾯，⽤浸有⽆菌盐⽔的棉拭⼦1⽀，在规格板内横竖往返均匀

涂擦各5次，并随之转棉拭⼦，连续采样4个，采样⾯积100cm2剪去⼿接触部位后，将棉拭⼦投⼊5ml含⽆菌盐⽔试管内，⽴

即送检。门把⼿等不规则物体表⾯⽤棉拭⼦直接涂擦采样

3..结果判定

Ⅰ、Ⅱ类区域细菌总数≤5cfu/cm2，

Ⅲ类区域细菌总数≤10cfu/cm2，

4.注意事项

采集样本要有⾜够的数量且具有代表性，如层流洁净⼿术室，选择具有代表性采样地点（如⼿术台、治疗车、⽆影灯把⼿

等）；

采样时，棉拭⼦处于湿润状态，如处于饱和状态可将多余的采样液在采样管壁上挤压去除。禁⽌使⽤⼲棉拭⼦采样。

四、消毒液的监测

1、常⽤消毒液有效成分含量测定

2、使⽤中消毒液细菌监测1ml使⽤中消毒液+9ml中和剂

3、结果判定使⽤中的灭菌⽤消毒液、⽆细菌⽣长。使⽤中⽪肤粘膜消毒液≤10cfu/ml其他使⽤中的消毒液细菌总数

≤100cfu/m

五、压⼒蒸汽灭菌效果监测⽅法

压⼒蒸汽灭菌效果监测是⼀组综合措施，包括⼯艺监测、化学监测、⽣物监测，各个环节缺⼀不可。

1、物理监测（⼜称程序监测）

每锅进⾏，并详细记录，包括灭菌设备故障检查，灭菌温度（波动+3度内）、压⼒、时间（最低要求）等灭菌参数。灭菌物

品包装、⼤⼩摆放正确等。

2、化学监测法

（1）包内化学指⽰卡监测

1）化学指⽰卡(管)监测⽅法:将既能指⽰蒸汽温度，⼜能指⽰温度持续时间的化学指⽰管(卡)放⼊⼤包和难以消毒部位的物品

包中央，经⼀个灭菌周期后，取出指⽰管(卡)，根据其颜⾊及性状的改变判断是否达到灭菌条件。

2）结果判定:检测时，所放置的指⽰管(卡)性状或颜⾊均变⾄规定的条件，判为灭菌合格；若其中之⼀未达到规定的条件，则

灭菌过程不合格。

（2）包外化学指⽰胶带监测

1）监测⽅法:将化学指⽰胶带粘贴于每⼀待灭菌物品包外，经⼀个灭菌周期后，观察其颜⾊的改变，以指⽰是否经过灭菌处

理，⽽不能作为灭菌效果判定指标。

2）结果判定:检测时，所放置的指⽰管(卡)、胶带的性状或颜⾊均变⾄规定的条件，判为灭菌合格；若其中之⼀未达到规定的

条件，则灭菌过程不合格。

（3）B-D试验⽤于预真空（包括脉动真空）压⼒蒸汽灭菌器冷空⽓排放效