紫外分光光度计的应用.ppt

标准对照法即采用一个标准溶液，与原点构成工作曲线计算公式为c样=A样/A标×c标注意标准样品的吸光度应控制在0.4~0.8以内较好第31页,共34页，5月，星期六，2024年，5月吸收系数法在特定波长，特定液层厚度下，测的样品的吸光度，乘以一定系数即可。如啤酒中双乙酰的测定第32页,共34页，5月，星期六，2024年，5月分光光度法的误差方法误差1.溶液偏离比耳定律2.反应条件的改变第33页,共34页，5月，星期六，2024年，5月感谢大家观看第34页,共34页，5月，星期六，2024年，5月关于紫外分光光度计的应用分光光度法的特点1.灵敏度高2.准确度高3.适用范围广4.操作简便快速、应用范围广第2页,共34页，5月，星期六，2024年，5月吸收光谱的分类远紫外线波长范围：10~200nm分析方法：真空紫外光度法近紫外线波长范围：200~380nm分析方法：紫外光度法可见线波长范围：380~780nm分析方法：比色及可见光度法第3页,共34页，5月，星期六，2024年，5月吸收光谱的分类近红外线波长范围：0.78~2.5um分析方法：近红外光谱法中红外线波长范围：2.5~5.0um分析方法：中红外光谱法远红外线线波长范围：5.0~1000um分析方法：远红外光谱法第4页,共34页，5月，星期六，2024年，5月溶液颜色与光吸收的关系互补色两种颜色的光按适当强度比例混合时，可以形成白光，这两种色光就称为互补色。黄绿青\|/橙——白光——青蓝/|\红紫红蓝第5页,共34页，5月，星期六，2024年，5月溶液颜色与光吸收的关系白光通过溶液时，溶液没有吸收的，该溶液呈无色透明状。白光通过溶液时，溶液全部吸收的，该溶液呈黑色。白光通过溶液时，溶液选择性吸收的，该溶液呈现被吸收波长光的互补色。如：KMnO4溶液，吸绿色而呈紫红色第6页,共34页，5月，星期六，2024年，5月光的吸收曲线将不同波长的光通过一定浓度和厚度的有色溶液，分别测出它们对各种波长的吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标画出曲线，称为光的吸收曲线。光吸收程度最大处的波长称为最大吸收波长。第7页,共34页，5月，星期六，2024年，5月光的吸收定律朗伯-比耳定律光的吸收与溶液的厚度与溶液的浓度成正比。A=kbcA-吸光度b-溶液的厚度c-溶液的浓度k-比吸收系数第8页,共34页，5月，星期六，2024年，5月光的吸收定律透光率透光率用T表示透光率的到数的对数为吸光度A=lg1/T比吸收系数含义入射波长一定时，溶液浓度1%，液层厚度为1cm时的吸光度。第9页,共34页，5月，星期六，2024年，5月光的吸收定律的适用范围各种有色的均匀溶液，一定的浓度范围。超过一定的浓度范围，曲线会发生正偏离或负偏离。偏离的原因1.入射光非单色光2.溶液中的化学反应3.比耳定律的局限性溶液浓度小于0.01mol/L的稀溶液第10页,共34页，5月，星期六，2024年，5月目视比色法工作原理朗伯-比耳定律:A=kbc其中A、k、b相同，c必定相同。优点1.仪器简单，操作简便2.液层较厚，灵敏度较高3.在特定条件下，不符合朗伯-比耳定律的溶液，仍可测定。缺点准确度较差第11页,共34页，5月，星期六，2024年，5月紫外可见分光光度计主要部件光源、单色器、吸收池、检测器、测量系统部分性能721分光光度计波长范围360~800nm玻璃棱镜读数方式：指针式754分光光度计波长范围200~800nm光栅读数方式：指针式第12页,共34页，5月，星期六，2024年，5月紫外可见分光光度计Cary-50分光光度计波长范围190~1100nm光栅读数方式：微机具有扫描功能第13页,共34页，5月，星期六，2024年，5