he染色protocol[解说]_原创文档.pdf

常规HE染色

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石蜡包埋的组织切片必须经过脱蜡水洗处理才能染色，让水溶性染料渗入组织中，含蜡的组

织切片无法进行任何染色。所以，在染色前必须用二甲苯或替换剂进行彻底脱蜡，经过乙醇

洗后，再用水洗。即石蜡组织切片→二甲苯→乙醇（无水乙醇，95%，80%）→水。人们通常

把这个过程叫做切片脱蜡至水。脱蜡至水是染色前的必须完成的基本步骤。一般脱蜡至水的

时间和步骤如下：

HE染色脱蜡至水步骤0

步骤顺序0试剂时间

1二甲苯Ⅰ脱蜡5min

2二甲苯Ⅱ脱蜡5min

3二甲苯Ⅲ脱蜡5min

4无水乙醇浸洗1min

595%乙醇Ⅰ浸洗1min

695%乙醇Ⅱ浸洗1min

780%乙醇浸洗1min

8自来水冲洗3-5min

冰冻切片和细胞涂片样品的染色不需要经过脱蜡至水步骤，水洗后直接用苏木精和伊红

染色。

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染色是利用染料的不同作用，使组织与染料以不同方式进行结合。常规染色是苏木精和

伊红染色（H.E）。特殊染色（specialstains）和组织化学（免役组织化学）染色是根据诊

断的需要对组织中的某些成分进行非常规的染色。

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HE染色用的苏木精是一种树木苏木的一种氧化产品，因为这种树非常罕见，多数氧化

苏木精是合成品。苏木精必须氧化成熟后才能使用。苏木精染液需要预先配制，放置几个月

自然氧化成熟。或购买成熟过的商品苏木精，也可在苏木精液中加一些成熟剂。

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苏木精本身对组织没有染色作用，需要“媒染剂”与组织连接，媒染剂是铁，铝，钨等

由这类正离子金属提供。矾也是苏木精常用的媒染剂，如Harris